大叶木姜子多糖含量测定与抑菌作用研究

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1、大叶木姜子多糖含量测定与抑菌作用研究摘要：从大叶木姜子中提取精制多糖，测定出大叶木姜子多糖对葡萄糖的换算数据，用蒽酮一硫酸比色法测定计算多糖的含量；采用Fent0n反应体系为模型，研宄多糖对细菌和真菌的抑制作用；采用滤纸片固定反应时间法研究多糖的体外抑菌作用。测得大叶木姜子多糖含量为4.88%,多糖对金黄色葡萄球菌有较好的抑制作用，对酵母灰绿曲霉和黑曲霉有一定的抑制效果。关键词：大叶木姜子；多糖；含量测定；抑菌作用中图分类号：S476+.9文献标识码：A文章编号：0439—811401-0076-03ResearchonContentDetermination

2、andAnti—bacteriostaticfromLitseachuniiChengvar.latifoliaH.S.KungHANJunAbstract：PolysaccharidewasextractedfromLitseachuniiChengvar.1atifo1iaH.S.Kung,anditscontentwasmeasuredbywayofanthrone-sulphuricacidcelorimetry.ItsbacteriostaticeffectonbacteriumandfunguswasstudiedbyFentonreactions

3、ystemasamodel.Thebacteriostasisinvitrowasstudiedbyfilterpaperfixingthereactiontime.TheresearchshowedthatpolysaccharidecontentofLitseachuniiChengvar.latifoliaH.S.Kungreached4.88%.IthadgoodinhibitoryeffectonStaphylococcusaureusandcertaininhibitoryeffectonyeast，Aspengi11usglaucusandAsp

4、ergi11usniger.Keywords：LitseachuniiChengvar.1atifo1iaH.S.Kung;polysaccharide；contentdetermination；bacteriosta大叶木姜子H.S.Kung），樟科木姜子属植物，灌木或小乔木。用于治疗风寒湿痛、跌打肿痛、产后水肿和寒泻，对心血管疾病也有一定的疗效［1］。多糖是一类免疫活性物质，具有抗肿瘤、抗病毒、抗寄生虫、抗衰老、抗、抗凝血、抗辐射等药理作用［2—5］。本研究采用石油醚去脂一95%乙醇去杂一热水提取一活性炭去色素的提取工艺，从大叶木姜子中提取多糖，测得大叶木

5、姜子多糖对葡萄糖的换算因子，用蔥酮一硫酸比色法测定并计算大叶木姜子多糖的含量，用于在实验室培养出来的细菌和真菌的抑制作用，期望为大叶木姜子的综合开发利用提供参考。1材料与方法1.1仪器、用品及材料1.1.1仪器721分光光度计、UVProbe-2550型紫外可见光光度计、电子天平、DZKW-D一2型数显电热恒温不锈钢水浴锅、离心机、蒸馏装置、抽虑装置、医用手提式压力锅、冰箱、GXZ型智能光照培养箱。1.1.2材料大叶木姜子采摘地点为云南省文山州西畴县董马乡七角巷，采摘时间为2008年4月中旬。灰绿曲霉、青霉、黒曲霉用沙氏真菌培养基培养，菌种来源于微生物室制备；

6、酵母菌来源于白酒中；金黄色葡萄球菌用高盐肉汤培养基培养。3试剂无水葡萄糖；蒽酮；硫酸、活性炭；醋酸铅；硫酸钠；无水乙醇、石油醚等。1.2方法1.2.1大叶木姜子多糖的提取与精制取干燥大叶木姜子粉末100g，置抽滤装置中，加入石油醚350mL,回流脱脂。用95%乙醇回流提取3次，每次6倍量，残渣挥干溶剂后，再蒸馏回流提取3次，每次6倍量，合并提取液，过滤、加入0.5%活性炭脱色1次，加入氯仿一正丁醇液轻摇，静置取多次，除去蛋白质。用离心机在2500r/min转速下离心1次，提取上层澄清液，加入醋酸铅直至溶液不产生沉淀为止，过量的醋酸铅加适量的硫酸钠除去，再在25

7、00r/min转速下离心1次，提取上层清液。加热溶液浓缩至1/5体积，滤液加3倍量无水乙醇静置一夜后蒸馏提纯，得到大叶木姜子多糖。1.2.2大叶木姜子多糖含量测定1）标准溶液的配制。精密称取干燥至恒重的葡萄糖标准品0.200g，置100mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度；摇匀，制成2.000mg/mL的标准溶液，精密量取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL标准溶液。置于10mL容量瓶中，以蒸榴水定容至刻度，摇匀，配成系列标准溶液。2）蒽酮一硫酸试液的配制。称取0.200g蒽酮和1.000g硫脲，加入100mL浓硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置暗处备用。

8、3）标准曲线的绘制。分别准确移取系列标