《苯酚-硫酸法测定花椒叶多糖含量》.pdf

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1、第33卷第4期食品科学技术学报Vo1.33No.4402015年7月JournalofFoodScienceandTechnologyJu1.2015doi:10.3969/j.issn.2095—6002.2015.04.008文章编号:2095~002(2015)04—0040-07引用格式:齐素芬,张华峰,姚美,等.苯酚一硫酸法测定花椒叶多糖含量[J].食品科学技术学报,2015,33(4):40—46.QISufen,ZHANGHuafeng,YAOMei,eta1.Developmentandap

2、plicationofphenol—sulfuricacidmethodfordeterminationofpolysaccharidesinZanthoxylumbungeanumleaves[J].JournalofFoodScienceandTechnology,2015,33(4):40—46.苯酚一硫酸法测定花椒叶多糖含量齐素芬,张华峰,姚美,程芳,王正齐,陈思雨(陕西师范大学食品工程与营养科学学院/药用资源与天然药物化学教育部重点实验室/西北濒危药材资源开发国家工程实验室,陕西西安710062)

3、摘要:建立了一种灵敏、特异、精确定量分析花椒叶多糖的苯酚一硫酸法,采用该方法测定了陕西大红袍花椒叶中多糖的含量。该方法选择半乳糖作为标准单糖,484am为工作波长。通过单因素实验和正交试验优化得到了较佳显色反应条件是加样次序为苯酚一样品一浓硫酸,显色温度为25℃,质量分数为5%的苯酚添加量为0.3mL,浓硫酸添加量为3.5mL,显色时间为30min。’系统适应性实验显示该方法的标准曲线方程为Y=0.0127x一0.0076(R=0.997),线性范围为10.O0—60.00I~g/mL,LOD和LOQ分别为

4、2.08g/mL和6.30g/mL,日内、日间精密度分别在0.49%~3.64%,5.17%~6.05%之间,平均回收率为101.19%。样品溶液在显色反应后的2h内稳定性较好。测定发现陕西大红袍花椒叶中W(多糖)在8.11~8.89mg/g之间。该方法为花椒叶多糖的定量分析和花椒叶资源的开发利用提供了参考。关键词:花椒叶;多糖;苯酚一硫酸法;显色反应中图分类号:TS207.3文献标志码:A芸香科(Rutaceae)花椒属(Zanthoxylum)植物花用多糖在浓硫酸作用下水解成单糖,并迅速脱水生椒(Zan

5、thoxylumbungeanum)的果皮是重要的传统香成糠醛衍生物进而和苯酚缩合成有色化合物,以葡料,在我国的种植面积约有21万hm。国内外学萄糖为标准单糖在490nm波长下进行比色分析。者对花椒果皮中挥发性芳香油、生物碱、香豆素、类黄该方法操作简便,快捷灵敏,无须大型仪器,但是其酮等的开发利用进行了广泛研究,但是对花椒叶准确性和重现性受实验条件(如显色反应)的影响资源的研究相对较少。花椒叶中含有蛋白质、氨基较大。为了给花椒叶多糖的定量分析和花椒叶资源的开发利用提供依据,本研究对苯酚一硫酸法酸、脂肪、维生

6、素、类黄酮等多种营养素和生物活性物的实验条件进行了优化,然后采用系统适应性实验质,在陕西省渭南市等很多地区作为蔬菜食用,但是进行了方法学评价,最终建立了灵敏、特异、精确的花目前对花椒叶多糖的研究却较鲜见¨。我们实验室椒叶多糖定量分析方法,并运用该方法测定了陕西大研究发现,花椒叶粗多糖具有抗氧化活性。准确测定红袍花椒叶中多糖的含量。花椒叶多糖的含量,系统分析花椒叶多糖的生物活性,对于花椒资源的科学开发和综合利用具有一定的1材料与方法积极意义。植物多糖的定量分析方法包括苯酚一硫酸法、蒽酮一硫酸法和地衣酚一硫酸法

7、等,其中最常1.1仪器与试剂用的方法是苯酚一硫酸法。该方法的原理是利TU一1810型紫外可见分光光度计,北京普析通收稿日期:2014—07—14基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金项目(GK201302048);陕西省大学生创新创业训练计划项目(ex13063)。作者简介:齐素芬,女,学士,研究方向为药食两用植物资源开发与利用;张华峰,男,副教授,博士,主要从事食品营养与安全方面的研究。通信作者。第33卷第4期齐素芬等:苯酚一硫酸法测定花椒叶多糖含量41用仪器有限责任公司;DL一4C型低速大容量离心1.

8、2.2.3显色时间对吸光度的影响机,上海安亭科学仪器厂;HH一2型恒温水浴锅,北按照质量分数为5%苯酚0.3mL、多糖溶液京科伟永兴仪器有限公司;RE一52型旋转蒸发仪,1.0mL、浓硫酸2.0mL的比例依次加样,混匀后在上海安亭实验仪器有限公司;BS224S型分析天平,室温下分别显色5,1O,20,25,30rain,测定吸光度。北京赛多利斯科学仪器有限公司。1.2.2.4浓硫酸添加量对吸光度的影响葡萄糖、半乳

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