丹红注射液对糖尿病大鼠肾组织nf—кb和肾功能影响的实验研究

《丹红注射液对糖尿病大鼠肾组织nf—кb和肾功能影响的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、丹红注射液对糖尿病大鼠肾组织NF_kB和肾功能影响的实验研宄邓青秦曙光李剑文周晓虹(广东省广州市第一人民医院药剂科510180)【摘要】目的:探讨丹红注射液对糖尿病大鼠肾组织nuclearfactorkappaB(NF—KB)和肾功能的影响。方法：选清洁雄性大鼠70只，随机分为糖尿病组(A)、糖尿病丹红治疗组(B)各25只和正常对照组(C)20只，前两组用链脲菌素(streptozotocin,STZ)诱导建立糖鉍病肾病大鼠模型，A组和C组等量生理盐水腹腔内注射，B组丹红2ml/kg腹腔内注射，三组给药后2w和6w宰杀，收集血和肾组

2、织标本检测NF-KB、血肌酐和血尿素氮水平，6w时收集尿标本检测尿肌酎水平。结果：1、肾组织NF—KB、血肌酐和血尿素氮水平为糖尿病组>丹红组>正常组，而血肌酐降低以2W组更明显(P<0.01);2、尿肌酐排泄比较：正常组>丹红组>糖尿病组，有统计学差异(P<0.05)。结论：丹红治疗组可能通过对肾组织NF—KB的影响而抑制肾脏增生，增加以肌酐排泄，降低血鉍素氮和血肌酐浓度发挥肾脏保护作用。【关键词】糖尿病/屮医药疗法丹红注射液/药效学动物实验人鼠【屮图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】209

3、5-1752(2012)13-0129-02糖尿病肾病(Diaobeticnephrpathy,DN)是糖尿病最学常见、最严重的慢性并发症之一，也是导致末期肾功能衰竭的主要原因。A前DN的治疗方法力求在积极控制诱因的基础上，寻求能阻断DN发生的药物。丹红注射为屮药丹参、红花按科学配方提取的复方制剂。临床应用发现丹红注射液能减低尿蛋白的排泄、延缓DN发展疗效更好。但更多为经验性用药，缺乏其作用机制、机理的深入研究。本实验将探讨丹红注射液对糖尿病大鼠肾组织NF-KB和肾功能的影响。为丹红注射液防治DN提供实验依据。1材料和方法1.1糖尿

4、病大鼠模型的建立及分组：取清洁雄性大鼠70只，体重200—250g(购于中山人学实验动物中心)。随机分为糖尿病(A)组和糖尿病丹红治疗(B)组各25只，正常对照(C)组20只。禁食12h后一次性腹腔注射链脲菌素(Streptozotocin，STZ，购自品美生物工程有限公司，美国ALEXIS公司生产)按55mg/kg，STZ溶于0.1mmol/L枸橼酸钠溶液(ph45)，对照组注入等量枸橼酸钠溶液。48h-72h取尾静脉血，美国雅培公司MedisenseOptiumQA3465一1083血糖仪检测血糖。血糖≥16.7mmol/

5、L确定为糖尿病模型建立成功。次日起B组丹红(菏泽步长制药冇限公司批号101272)2ml/kg/d腹腔内注射，C组和A组给予等量生理盐水腹腔内注射。用药后2W随机抽取N组4,DM组6只，EB组8只宰杀，6W时宰杀所有动物C组8只，A组6只，B组11只。试验过程中所有大鼠自由饮水，普通饲料喂养，不使用任何降糖药物。实验中监测血糖及酮体，对血糖过高且奋酮症的大鼠临吋一次性注射胰岛素2-4单位/只。1.2标本收集与检测：糖尿病模型建立采用宰杀前称体重。收集人鼠处死前即刻尿，-20°C储存待测尿肌肝•，摘眼球法留取样动物血2000rpm离心

6、10min，留取血浆。我院检验中心OLYMPUSAU2700全自动生化分析仪检测血肌酐、血尿素氮和尿肌酐。取肾，去除肾包膜及肾门结缔组织并用生理盐水清洗干净称右肾重量，肾组织-70°C保存。NF-kB免疫组织化学检测：将置于10%福尔马林溶液中浸泡固定的肾组织，常规酒精脱水，石蜡包埋，将其制成3μm厚切片。石蜡切片常规脱蜡至水，微波加热抗原修复，石蜡切片用PBS浸泡10min→3%?H2O2-甲醇液中10min→PBS洗2min/次×3次→加一滴10%山羊血清孵育lOmin→

7、加100μ—I抗，4°C过夜→PBS洗2min/次×3次→加二抗孵育10min→PBS洗2min/次×3次→加DAB显色液室温显色8min—自来水冲洗、复染→脱水、透明、封片。结果采用HPIAS—1000高清晰度彩色病理图文报告分析系统，每张切片随机选20个肾小球视野，高倍视野下(×400>分别计数每个肾小球视野内阳性细胞数(细胞核呈棕褐色)，均值表示每例肾小球中阳性细胞数。1.3统计分析：实验数据均以x±s表示，应用SPSS1

8、1.0软件包进行统计分析计量资料采用t检验，组间比较用方差分析。2结果2.1各组大鼠尿肌酐的比较：见表1。与C组相比，A和B组尿肌酐降低(P<0.01)；B组与A组比较,B组较A组尿肌酐升高(P<0.05)。表I各组大鼠尿