药学毕业论文左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上cd4,cd28和c

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1、XX大学毕业论文左旋咪醴诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的实验研究姓名:2014年6月25日左旋咪醴诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的实验研究作者:李侃,李彬,何家富,龚权,张燕翔,张道明,郑晓姐,丁建中【摘要】目的观察左旋咪畔(LMS)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的影响,并探讨LMS诱发炎性脱髓梢口质脑病发病机制。方法采用流式细胞术检测EAE大鼠脊髓单个核细胞上CD4,CD28和CD15

2、2的表达水平。结果LMS同时给药组和预处理的EAE组大鼠脊髓内单-个核细胞上CD4和CD28的表达水平,均明显高于非LMS处理的EAE模型组。结论LMS能促进EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD4和CD28的表达,捉示LMS上调CD4和CD28的表达与可能LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病有关。【关键词】左旋咪呼实验变态反应性脑脊髓炎Abstract:ObjectiveToobservetheefleetoflevamisole(LMS)onexpressionsofCD4,CD28andCD152onmononuclearcellsinspinalcor

3、dsofratswithexperimentalallergicencephalomyelitis(EAE),andstudythepathogenesisofinflammatorydemyelinatingleukoencephalopathyinducedbyLMS・MethodsUsingflowcytometry,wcdetectedlevelsofCD4,CD2&CD152inmononuclearcellsinspinalcordsofEAErats.ResultsTheexpressionlevelofEAEratstreatedw

4、ithLMSshowedhigherthanthatofratstreatedwithoutLMS.ConclusionLMScouldexacerbateEAEbyenhancingtheexpressionsofCD4andCD28inspinalcordsofEAErats,andup-regulationofexpressionsofCD4andCD28mayplayacrucialroleininflammatorydemyelinatingleukoencephalopathyinducedbyLMS.Keywords:Levamiso

5、le;Experimentalallergicencephalomyelitis左旋咪^(Levamisole,LMS)为四咪哇的左旋界构体,是国家和WHO抗蠕虫病基本药物,作为广谱驭肠虫药使用于临床。1971年,Renoux发现LMS具冇增强免疫的作用,其作为免疫增强剂被推广用于慢性感染、皮肤疾病、自身免疫性疾病及肿瘤等疾病的免疫调节辅助治疗,长期以来被认为安全低毒。但近二十年來,国内外发现LMS能导致严重的中枢神经系统(CNS)功能障碍一左旋咪呼性白质脑病。LMS与LMS性白质脑病的因果关系,已被系统的药物流行病学研究所证实[1],但其诱发该病

6、的确切发病机制仍不清楚。实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE)为CD+4T细胞介导的对髓梢抗原的口身免疫性疾病,是研究炎性脱髓梢口质脑病的经典动物模型。木研究通过观察LMS对EAE犬鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的影响,探讨LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病发病机制。1材料1」动物雌性SD大鼠,5〜8周龄,体重170〜210go豚鼠(雌雄不拘),质量250〜300g,由华屮科技大学同济医学院实验动物屮心提供。动物购回后先适应性饲养1周,饲养条件为室温18〜28

7、°C,相对湿度40%〜70%,每日12h光照维持,昼夜循环,自由饮水,分笼饲养。1.2一药物与试剂左旋咪呼购于Sigma公司。卡介苗(Bacillecalmetteguerin,BCG)>百日咳疫苗(Bordetellapertussisvaccine,BPV)购于卫生部上海生物制品研究所。淋巴细胞分离液购于美国CaltagLaboratories公司。胰蛋白溶液购于杭州吉诺牛物医药技术有限公司。FITC标记的小鼠抗大鼠CD152抗体、APC标记的小鼠抗大鼠CD4抗体、PE标记的小鼠抗大鼠CD28抗体以及3种相应荧光素标记的小鼠IgGl抗体,均购口

8、美国Pharmacia公司。1.3仪器流式细胞仪美国贝克曼库尔特有限公司产品。2方法2」抗原的制备将豚鼠经腹腔注射100g

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