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时间:2018-07-07
《左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上cd4,cd28和cd152表达的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的实验研究:李侃,李彬,何家富,龚权,张燕翔,张道明,郑晓娟,丁建中【摘要】 目的观察左旋咪唑(LMS)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的影响,并探讨LMS诱发炎性脱髓鞘白质脑病发病机制。方法采用流式细胞术检测EAE大鼠脊髓单个核细胞上CD4,CD28和CD152的表达水平。结果LMS同时给药组和预处理的EAE组大鼠脊髓内单个核细胞上CD4和CD28的表达水平,均明显高于非LMS处理的EAE模型组。结论LMS能促进EAE
2、大鼠脊髓内单个核细胞上CD4和CD28的表达,提示LMS上调CD4和CD28的表达与可能LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病有关。【关键词】左旋咪唑实验变态反应性脑脊髓炎 Abstract:ObjectiveToobservetheeffectoflevamisole(LMS)onexpressionsofCD4,CD28andCD152onmononuclearcellsinspinalcordsofratsentalallergicencephalomyelitis(EAE),andstudythepathogenesisofinflammatorydemyelina
3、tingleukoencephalopathyinducedbyLMS.MethodsUsingfloetry,ononuclearcellsinspinalcordsofEAErats.ResultsTheexpressionlevelofEAEratstreatedayplayacrucialroleininflammatorydemyelinatingleukoencephalopathyinducedbyLMS. Keyisole;Experimentalallergicencephalomyelitis 左旋咪唑(Levamisole,LMS)为四咪唑的
4、左旋异构体,是国家和S具有增强免疫的作用,其作为免疫增强剂被推广用于慢性感染、皮肤疾病、自身免疫性疾病及肿瘤等疾病的免疫调节辅助治疗,长期以来被认为安全低毒。但近二十年来,国内外发现LMS能导致严重的中枢神经系统(S)功能障碍—左旋咪唑性白质脑病。LMS与LMS性白质脑病的因果关系,已被系统的药物流行病学研究所证实[1],但其诱发该病的确切发病机制仍不清楚。实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE)为CD+4T细胞介导的对髓鞘抗原的自身免疫性疾病,是研究炎性脱髓鞘白质脑病的经典动物模型。本研究通过观察
5、LMS对EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD4,CD28和CD152表达的影响,探讨LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病发病机制。 1材料 1.1动物 雌性SD大鼠,5~8周龄,体重170~210g。豚鼠(雌雄不拘),质量250~300g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。动物购回后先适应性饲养1周,饲养条件为室温18~28℃,相对湿度40%~70%,每日12h光照维持,昼夜循环,自由饮水,分笼饲养。 1.2药物与试剂 左旋咪唑购于Sigma公司。卡介苗(Bacillecalmetteguerin,BCG)、百日咳疫苗(Bordetellapertussisv
6、accine,BPV)购于卫生部上海生物制品研究所。淋巴细胞分离液购于美国CaltagLaboratories公司。胰蛋白酶溶液购于杭州吉诺生物医药技术有限公司。FITC标记的小鼠抗大鼠CD152抗体、APC标记的小鼠抗大鼠CD4抗体、PE标记的小鼠抗大鼠CD28抗体以及3种相应荧光素标记的小鼠IgG1抗体,均购自美国Pharmacia公司。 1.3仪器 流式细胞仪美国贝克曼库尔特有限公司产品。 2方法 2.1抗原的制备将豚鼠经腹腔注射100g/L的水合氯醛麻醉后,经主动脉灌注生理盐水至无血液流出时,小心取出脊髓,剥除脊膜,加预冷的生理盐水制成50%(S同时给
7、药组):先按体重经腹腔注射NS(10ml/kg),2次/d,共7d,再经四足垫皮下注射GPSCH-CFA乳剂,0.4ml/只,于第0,24及48小时腹腔注射LMS(10mg/kg)。第2组(LMS预处理组):先按体重经腹腔给SD大鼠注射LMS(10mg/kg),2次/d,共7d,再经四足垫皮下注射GPSCH-CFA乳剂,共0.4ml/只,于第0,24及48小时腹腔注射同量NS。第3组(EAE模型组):先按体重经腹腔注射NS10mg/kg,2次/d,共7d,再经四足垫皮下注射GPSCH-CFA乳剂,共0.4ml/只,于第0,24及48小时经腹腔注射同量
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