左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上cd4，cd28和cd152表达的实验研究论文

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1、左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的实验研究论文左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的实验研究时间:2016-07-1001:37:42阅读:次作者:freelisole(LMS)onexpressionsofCD4,CD28andCD152onmononuclearcellsinspinalcordsofratsentalallergicencephalomyelitis(EAE),andstudythepathogene

2、sisofinflammatorydemyelinatingleukoencephalopathyinducedbyLMS.MethodsUsingfloetry,ononuclearcellsinspinalcordsofEAErats.ResultsTheexpressionlevelofEAEratstreatedayplayacrucialroleininflammatorydemyelinatingleukoencephalopathyinducedbyLMS.Keyisole;Experimentalallergicen

3、cephalomyelitis左旋咪唑(Levamisole,LMS)为四咪唑的左旋异构体，是国家和S具有增强免疫的作用,其作为免疫增强剂被推广用于慢性感染、皮肤疾病、自身免疫性疾病及肿瘤等疾病的免疫调节辅助治疗，长期以来被认为安全低毒。但近二十年来，国内外发现LMS能导致严重的中枢神经系统（S）功能障碍—左旋咪唑性白质脑病。LMS与LMS性白质脑病的因果关系，已被系统的药物流行病学研究所证实［1］，但其诱发该病的确切发病机制仍不清楚。实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergicencephalomyeliti

4、s,EAE)为CD+4T细胞介导的对髓鞘抗原的自身免疫性疾病,是研究炎性脱髓鞘白质脑病的经典动物模型。本研究通过观察LMS对EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的影响，探讨LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病发病机制。1材料1.1动物雌性SD大鼠，5～8周龄，体重170～210g。豚鼠(雌雄不拘)，质量250～300g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。动物购回后先适应性饲养1周，饲养条件为室温18～28℃，相对湿度40％～70％，每日12h光照维持，昼夜循环，自由饮水，分笼饲养。1.2药物与试剂左旋咪唑购

5、于Sigma公司。卡介苗（Bacillecalmetteguerin,BCG）、百日咳疫苗（Bordetellapertussisvaccine,BPV）购于卫生部上海生物制品研究所。淋巴细胞分离液购于美国CaltagLaboratories公司。胰蛋白酶溶液购于杭州吉诺生物医药技术有限公司。FITC标记的小鼠抗大鼠CD152抗体、APC标记的小鼠抗大鼠CD4抗体、PE标记的小鼠抗大鼠CD28抗体以及3种相应荧光素标记的小鼠IgG1抗体，均购自美国Pharmacia公司。1.3仪器流式细胞仪美国贝克曼库尔特有限公司产品。2方法2.1

6、抗原的制备将豚鼠经腹腔注射100g/L的水合氯醛麻醉后，经主动脉灌注生理盐水至无血液流出时，小心取出脊髓，剥除脊膜，加预冷的生理盐水制成50%(S同时给药组)：先按体重经腹腔注射NS(10ml/kg)，2次/d，共7d，再经四足垫皮下注射GPSCH-CFA乳剂，0.4ml/只，于第0，24及48小时腹腔注射LMS(10mg/kg)。第2组(LMS预处理组)：先按体重经腹腔给SD大鼠注射LMS(10mg/kg)，2次/d，共7d，再经四足垫皮下注射GPSCH-CFA乳剂，共0.4ml/只，于第0，24及48小时腹腔注射同量NS。第3组

7、(EAE模型组)：先按体重经腹腔注射NS10mg/kg，2次/d，共7d，再经四足垫皮下注射GPSCH-CFA乳剂，共0.4ml/只，于第0，24及48小时经腹腔注射同量的NS。第4组(对照组)：先按体重经腹腔给SD大鼠注射同量的NS，2次/d，共7d，再经四足垫皮下注射CFA和NS制成的乳剂，共0.4ml/只，于第0，24及48小时腹腔注射同量的NS。4组动物均在免疫后的当日，经左腹股沟皮下注射百日咳疫苗0.1ml(约1×109菌体)。2.3动物行为改变的观察免疫后每日早晚各观察动物行为的改变1次，并详细记录，同时记录其体质量的变

8、化，于第25天全部处死。2.4大鼠神经功能受损情况观察根据Kono等［2］报道的标准，定为0～5分：无明显异常者为0分，尾巴无力者为1分，轻微后肢无力者为2分，严重后肢麻痹者为3分，四肢麻痹者为4分，死亡者为5分。2.5大鼠脑、脊髓的