益肾蠲痹丸对 KOA模型家兔软骨中 NO、NOS水平影响的实验分析

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1、硕士学位论文原创性声明本人所呈交的硕士学位论文，是在导师郑福增主任医师的指导下，独立进行科学研究工作所取得的成果。除文中已特别加以注明引用的内容外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。特此声明。论文作者（签名）：年月日硕士学位论文使用授权声明本人已完全了解河南中医学院有关保留、使用硕士学位论文的相关规定，同意学校保留或向国家有关部门、机构送交本学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权河南中医

2、学院可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本论文（注：保密论文在解密后适用本授权声明）。特此声明。论文作者（签名）：导师（签名）：年月日年月日目录中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„6材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„81实验材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„82实验方法„„„„„„„„„„„„„„„„„

3、„„„„„„8结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„11理论探讨„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„141中西医学对膝关节骨关节炎的认识„„„„„„„„„„„„142NO、NOS与骨关节病关系的研究进展„„„„„„„„„„„„„163作用于NO、NOS系统药物的研究进展„„„„„„„„„„„„„194导师的学术思想„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„20结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„23致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„24参考文献„„„„„„„„„

4、„„„„„„„„„„„„„„„„25附录1实验照片„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„272文献综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„29中文摘要摘要目的：本课题以中医理论为指导，结合现代医学及实验理论知识，观察益肾蠲痹丸对膝骨关节炎（KOA）模型家兔软骨中NO、NOS水平的影响，从而探讨其防治KOA的作用及机制。方法：实验用新西兰大白兔36(+3)只，雌雄各半。随机分为模型组（生理盐水组）、对照组（硫酸氨基葡萄糖组）及实验组（益肾蠲痹丸组）,每组12只；3组家兔均采用Hulth法建立KOA模型，按Meeh-Rubn

5、er公式：A(体表面积)=K(系数)·W(体重g)2/3·10-4计算体表面积，折算后给兔灌服；模型复制成功后开始给药,实验组给予益肾蠲痹丸，对照组给予硫酸氨基葡萄糖，模型组给予等量的生理盐水灌服；于治疗后第2w、6w、10w分3批(每批每组4只)处死家兔，迅速取出股骨内侧髁矢状剖面标本2块：一块用1/1000的分析天平称取软骨质量200mg,用组织匀浆器研碎后加入9.0g/L氯化钠注射液制成质量分数为10%的组织匀浆,放入4℃冰箱16～18h，再置于-20℃保存备用；一块用体积分数为10%甲醛固定，10%硝酸脱钙，经石蜡包埋、切片后，应

6、用常规苏木素—伊红（HE）染色、番红O及甲苯胺蓝两种软骨基质组织化学染色；NO、NOS代谢水平的影响用NO、NOS试剂盒检测显示；病理损伤依Mankin法进行KOA评分并分级。结果：①大体观各组家兔在造模后即出现跛行，治疗组在治疗后跛行的数量逐渐少于其它组；模型组家兔体重在10w时明显低于对照组及实验组，实验组家兔较治疗前体重增加量大于对照组。②在相应的疗程后，取材分离股骨髁，肉眼观察治疗组关节软骨及滑膜结构优于对照组，模型组最差；依Mankin法进行评分，治疗2w后对照组、治疗组评分与模型组组间比较无显著性差异（P>0.05），对照组、

7、治疗组组间比较无显著差异（P>0.05）；治疗6w后，对照组、治疗组评分与模型组组间比较有显著性差异（P<0.05），对照组、治疗组组间比较无显著性差异（P>0.05）；治疗10w后，对照组、治疗组评分与模型组相比有显著性差异（P<0.05），对照组、治疗组组间比较有显著性差异（P<0.05）；③关节软骨中NO、NOS含量检测：治疗2w后对照组、治疗组关节软骨中NO、NOS含量与模型组组间比较无显著性差异（P>0.05），对照组、治疗组组间比较无显著差异（P>0.05）；治疗6w后，对照组、治疗组关节软骨中NO、NOS含量与模型组组间比较

8、有显著性差异（P<0.05），对照组、治疗组组间比较无显著性差异（P>0.05）；治疗10w后，对照组、治疗组关节软骨中NO、NOS含量与模型组相比有显著性差异（P<0.05），对照组、治疗组