补肾益气方对家兔koa软骨组织中aqp3表达的影响

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1、学院代号10716学号010021421090专业代码450227密级陕西中医学院ShaanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文补肾益气方对家兔KOA软骨组织中AQP3表达的影响学位申请人武钰专业名称中西医结合临床申请学位类型临床医学硕士专业学位指导教师姓名刘德玉论文提交日期2013年4月陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发

2、表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名日期：年月日关于学位论文使用授权的声明陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名日期：年月日论文导师签名日

3、期：年月日摘要目的：本课题组拟用观察补肾益气方对家兔KOA关节软骨中AQP3含量的变化和组织形态学改变，探讨补肾益气方防治家兔KOA软骨退变中的可能作用机制，为临床早期防治人类骨性关节炎提供动物实验依据。方法：选取健康新西兰长耳大白兔4月龄，40只，体重为2.5-3.5kg，雄性。随机均分为空白组（A组），生理盐水模型组（B组），盐酸氨基葡萄糖对照组（C组）和补肾益气中药防治组（D组）。适应性饲养一周后，开始造模。除空白组外，余组动物均采用石膏管形固定致家兔膝骨性关节炎模型造模方法，将右侧膝关节伸直位石膏外固定6周，使右侧膝关节不能活动，制作膝骨性关节

4、炎模型，6周后去除石膏，造成兔膝骨性关节炎病变模型。从造模开始的第1天开始灌胃，疗程时间为4周，灌胃情况如下：A组：不灌胃；B组：每日以与用药组等容（2ml/d）的生理盐水灌胃，分早晚两次灌服；C组：每日以相当于临床成人剂量5倍的盐酸氨基葡萄糖灌胃，分早晚两次灌服；D组：每日以相当于临床成人剂量10倍的补肾益气方药灌胃，分早晚两次灌服。于造模后的第2周、第4周、第6周观察实验动物的精神状态，饮食情况，毛色、体重、尿量、饮水量，步态、关节活动度，呼吸等指标。于6周后处死动物,采集关节软骨，肉眼观察关节软骨的病理变化情况。光学显微镜观察，应用苏木素一伊红(

5、HE)染色法观察软骨组织的形态学结构和特点。②应用免疫组织化学法（SABC法）检测各组动物关节软骨中AQP3的表达及分布差异。结果：6周后取实验动物膝关节软骨：除空白组外，模型组软骨外观及结构呈现粗糙且有裂隙，有骨赘形成，关节液增多，变黄，粘稠，软骨表层纤维化，细胞排列紊乱。对照组和治疗组关节软骨表面软化变薄但平滑，呈白色；滑膜轻度增生粘连，关节液较空白组有所增多。依照Mankin评分标准，AQP3的表达及分布差异在各组比较，空白组与模型组间，对照组与模型组间，治疗组与模型组间比较差异均有显著性，P＜0.05；对照组与治疗组比较无明显差异性，P＞0.0

6、5。结论：1.AQP3存在于兔膝骨关节软骨中，AQP3在空白组软骨组织中仅有少量表达；在轻度KOA组软骨组织中呈弱阳性表达，胞浆呈现浅棕黄色；在严重KOA组呈强阳性表达，胞浆呈深棕黄色。经肉眼及镜下观察治疗组与对照组关节软骨的病理改变明显轻于模型组。2.补肾益气方能显著降低兔膝骨性关节炎(KOA)关节软骨中AQP3的表达，与模型组相比有显著性差异(P＜0.05)；能明显缓解关节肿胀，延缓软骨降解，具有软骨保护作用，提示AQP3可能是参与兔KOA发病机制因素之一，补肾益气方对兔KOA能起到一定的预防治疗作用。关键词：膝骨性关节炎；补肾益气方；软骨；水通道

7、蛋白-3TheexperimentalstudyonexpressionofAQP3inthearticularcartilageofrabbitkneeosteoarthritisbyBushenyiqiformulatreatmentAbstractObjective:TostudytheeffectoncontentsofAQP3,andchangeofhistomorphologyofrabbitkneeosteoarthritiscartilagebyBushenyiqiFordulatreatmentandobservesitscurati

8、veeffect.Method:ThefortyJapanbigearrabbitsmalea