维a酸对人类恶性黑色素瘤a375细胞增殖的影响论文

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1、维A酸对人类恶性黑色素瘤A375细胞增殖的影响论文牛新武，冯捷，彭振辉，马惠群，刘超，张宪旗【关键词】细胞分裂EffectsofretinoidsonproliferationofhumanmelanomacelllineA375【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectsofdiverseretinoidsandreceptoragonistsininhibitingproliferationofhumanmelanomacelllineA375.METHODS:Humanmelan

2、omacelllineA375eter.RESULTS:BothretinoidsandTTNPBinhibitedtheproliferationofA375cells,butMAhadnosucheffect.Atallconcentrations(10-5,10-6and10-7mol/L)in24hand10-5mol/Lin48and72h,TTNPBhadthemostpool/Lin24and48h,TTNPBhadthemostpoanmelanomacelllineA375.Itisnotthea

3、ctivationofRXRbuttheactivationofRARthatmayberelatedtotheseeffects.【Keyelanoma;A375cells;celldivision【摘要】目的：研究维A酸(RA)抑制人类恶性黑色素瘤A375细胞增殖的作用.方法：用RA（atRA,13cisRA和9cisRA）、MA（RXR激动剂）及TTNPB（RAR激动剂）处理培养的人类恶性黑色素瘤A375细胞.用MTT法研究这些试剂对细胞增殖的影响，用流式细胞仪研究这些试剂对细胞周期的影响.结果：RA和TTN

4、PB均可抑制A375细胞的增殖，而MA无此作用.在作用24h时的不同浓度（10-5,10-6和10-7mol/L）以及作用48和72h的10-5mol/L浓度时.freelol/L浓度时，TTNPB的诱导G0/G1期阻滞作用均强于其它试剂处理组（P0.05）.结论：RA可抑制人类恶性黑色素瘤A375细胞的增殖，并诱导G0/G1期阻滞.RA的这些作用与RXR的激活无关，而可能与RAR的激活有关.【关键词】维生素A酸类；黑色素瘤；A375细胞；细胞分裂0引言恶性黑色素瘤是常见的皮肤恶性肿瘤，近年来发生率有增长趋势［1］

5、,但至今尚无有效的治疗方法.维A酸(RA)能够抑制多种恶性肿瘤细胞株的生长，并且可诱导其向正常细胞分化［2］.RA在体内主要是通过RA受体（RAR）和RAX受体（RXR）发挥多种生理或药理学作用的.然而，RA抑制肿瘤细胞增殖的作用与RAR和RXR的关系至今尚不清楚.本实验中，我们研究了3种RA和2种RA受体激动剂对人类恶性黑色素瘤A375细胞株的抑制作用.1材料和方法1.1材料人类恶性黑色素瘤A375细胞株（西安交通大学第二医院皮肤科冉立伟博士惠赠）.全反式RA（atRA）、13顺RA（13cisRA）、9顺RA（

6、9cisRA）、Methopreneacid（MA,RXR激动剂）、TTNPB(RAR激动剂)、二甲基亚砜（DMSO）购于美国Sigma公司.所有RA以10-2mol/L浓度溶于DMSO，-70℃避光保存.MTT购于中山公司.细胞培养所需的主要试剂为Gibco产品.高通道多功能微板测试系统（德国BMG公司）.FACSCalibur型流式细胞仪（美国BD公司）.1.2方法人类恶性黑色素瘤A375细胞于含100mL/L胎牛血清RPMI1640（含1×106u/L青霉素和1×106u/L链霉素）中培养.在37℃,50mL

7、/LCO2条件下进行细胞培养.当细胞生长达到70%～80%融合时，胰酶消化并传代细胞.将处于对数生长期的细胞接种于96孔培养板，于细胞培养箱中孵育4h后取出，加入各种试剂及100mL/LFBSRPMI1640.每孔液体总量最终为200μL，试剂终浓度为1×10-5,.freelol/L.每孔细胞数为1×104个.设对照组（只加细胞不加试剂）和空白对照组（只加100mL/LFBSRPMI1640）.每组设3个平行孔.将培养板移入细胞培养箱孵育24,48或72h.取出培养板，每孔中加入MTT20μL后再次孵育4h，弃上

8、清液后每孔加入DMSO150μL.高通道多功能微板测试系统中振荡5min后在570nm波长处检测A值.重复实验3次.另将细胞种于6孔培养板，于细胞培养箱中孵育4h后取出，避光加入各种试剂及100mL/LFBSRPMI1640.每孔液体总量为4mL，试剂终浓度为1×10-5mol/L，每孔细胞数为2×105个.每次实验设1个对照组（只加细胞不加试剂）.每组设2