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1、补骨脂对A375人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响论文.freelcontainingPsoraleaonproliferationandmelanogenesisinA375humanmelanomacellsbyserumpharmacologicalmethod.MethodA375humanmelanomacellsediumduringlogarithmicgroinedbyMTTandNaOHmethod.ResultsTheretestgrouponproliferation,andthere
2、drug-containedserumonmelanogenesis(P＜0.01).ConclusionSerumcontainingPsoraleahasstrongeffectofpromotingA375humanmelanomacellsproliferationandmelanogenesisinvitro.Key；melanogenesis；cellproliferation补骨脂为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的果实,性味辛、苦、温,.freelresco),CO
3、2培养箱(SANYAO),酶标仪(BIO-RAD)等。1.3动物SD大鼠24只,雄性,体重(200±20)g,新疆自治区疾病控制中心实验动物中心提供,许可证号：SYXK(新)2003-0003。2实验方法2.1分组、给药及含药血清制备4-5按完全随机化设计方案,将24只大鼠分为4组,每组6只。药物粉末过100目筛制备为CMC-Na混悬剂。具体分组给药操作如下：正常对照组灌胃生理盐水；补骨脂低(0.038g/d)、中(0.19g/d)、高(0.38g/d)剂量组每日分2次灌胃,连续给药3d,正常饮食饮水。末
4、次给药后2～3h腹主动脉无菌取血,分离血清,0.22μm微孔滤膜除菌,-20℃保存备用。2.2A375细胞的培养含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养6。2.3细胞增殖测定采用MTT法测定7。每次实验取同一传代细胞,取对数生长期A375细胞,0.25%胰酶消化3min,0.4%台盼蓝计数。使用含10%胎牛血清的完全DMEM培养基调整细胞浓度为5×104/mL,接种于96孔板,每孔100μL。5%CO2培养箱中37℃培养24h。弃去培养基,加入3个剂量不同浓度的含药血清培养液100μL,对照组加入100μ
5、L的10%空白血清培养液继续培养48h。48h后,加5mg/mLMTT20μL/孔,37℃、5%CO2培养4h后弃上清,加入DMSO150μL,震荡10min左右。立即于490nm测定吸光度值。用吸光度值(OD)表示细胞增殖活性。2.4黑素生成测定采用NaOH法测定7-8,并稍加改动。细胞培养方法和分组方法同上。放入5%CO2培养箱中37℃继续培养48h后,弃去培养基,PBS液洗2遍。加入1mol/LNaOH100μL/孔,37℃放置24h；于490nm测定吸光度值。用吸光度值(OD)表示黑素含量。3统计
6、学方法实验结果以—x±s表示,组间差异的显著性检验采用SPSS10.0软件进行方差分析,用t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。x【摘要】目的探讨含补骨脂大鼠血清对A375细胞增殖及合成黑素功能的影响。方法体外培养A375人黑素瘤细胞,于对数生长期添加不同浓度含补骨脂大鼠血清,分别采用MTT法和NaOH法检测细胞增殖及合成黑素的情况。结果补骨脂高、中、低剂量含药血清组较空白血清组有明显促增殖作用,在20%的添加浓度时,高、中、低3个剂量含药血清组随着剂量的增加,黑素含量也明显升高(P＜0.01)。结论
7、补骨脂含药血清有促进A375黑素瘤细胞增殖作用,并使A375人黑素瘤细胞合成黑素增加。【关键词】补骨脂；含药血清；黑素合成；细胞增殖EffectofPsoraleaonProliferationandMelanogenesisinA375HumanMelanomaCellTANGXiao-qin1,YANMing2,GAOLi2,etal(PharmacyCollegeofShiheziUniversity,Shihezi832000,China；XinjiangInstituteofTraditiona
8、lUighurMedicine,Urumqi830049,China)Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofserumcontainingPsoraleaonproliferationandmelanogenesisinA375humanmelanomacellsbyserumpharmacologicalmethod.MethodA375humanmelanomacellsediumdur
