心衰大鼠心肌细胞对ca2+和异丙肾上腺素的反应论文

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1、心衰大鼠心肌细胞对Ca2+和异丙肾上腺素的反应论文【摘要】目的观察异丙肾上腺素致大鼠心衰后心肌细胞对不同浓度的Ca2+和异丙肾上腺素的反应。方法用异丙肾上腺素制作大鼠心衰模型;测血流动力学指标验证；动物随机分为正常组和心衰组;分离心肌细胞测定细胞存活率和单个细胞在不同浓度Ca2+和异丙肾上腺素刺激下的收缩幅度。结果与正常对照组比较，心衰组大鼠血流动力学明显改变（P0.05），心肌细胞存活率下降（P0.01），对不同浓度的Ca2+和异丙肾上腺素的反应也较同浓度正常对照组心肌细胞收缩幅度下降（P0.01）。结论排除神经和体液因素的

2、影响后，心衰大鼠心肌细胞自身对Ca2+和异丙肾上腺素的反应性下降。【关键词】心力衰竭心肌细胞异丙肾上腺素Abstract:ObjectiveToinvestigatethereactionofcardiomyocytesfromisoproterenol-inducedheartfailurerattodifferentconcentrationsofcalciumandisoproterenol.MethodsSDratslydividedintoaheartfailuregroupandacontrolgroup,.fre

3、elerusedtoinduceheartfailureodynamicparametersoftheanimalandthecontractionamplitudeandsurvivalrateofisolatedcardiomyocytesined.Resultsparedyocytesurvivalrateandcontractionamplitudeoralregulationsexcluded,thecontractionofcardiomyocytesthemselvesisreducedinisoproteren

4、ol-inducedheartfailurerats.Keyyocytes;isoprenaline心衰是包括心肌梗死、心肌炎、高血压性心脏病等心血管疾病的最后阶段。这些疾病往往引起心肌细胞的凋亡和细胞数目减少，最终导致心衰。目前，大多数研究都是在整体水平上观察心肌细胞的改变，本研究排除神经和体液等因素的影响.freela公司），胶原酶Ⅱ型（Gibco公司），透明质酸酶（Sigma公司），Hepes（北京华美），DMEM(高糖)培养基（Hyclone公司），牛磺酸（Sigma公司），肌酸（Sigma公司），牛血清白蛋白（Amr

5、esco公司）。1．3心力衰竭动物模型的制作参考Rona等［1］异丙肾上腺素所致心衰的方法略作修改。心衰组腹腔注射异丙肾上腺素4mg/kg，1次/d，连续3天。1．4正常及心衰大鼠血流动力学测定大鼠注射异丙肾上腺素完成1周后，存活8只，用戊巴比妥钠（50mg/kg）腹腔注射麻醉，分离右颈总动脉，置入微压力传感导管，测血压及左心室压力最大上升、下降速率（±dp/dt）变化，考查模型成功情况。1．5正常及心衰大鼠心肌细胞对不同浓度Ca2+和ISO的反应1．5．1心肌细胞的分离和培养大鼠测完血流动力学指标后，迅速开胸取心脏，悬挂心脏

6、于Langendorff灌注装置上，经主动脉逆行灌流分离心肌细胞［2］。将新分离的正常和心衰心肌细胞计数后，分为正常组和心衰组，接种于12孔培养板上，置于CO2培养箱中悬浮培养24h。1．5．2培养心肌细胞存活率的计算将长杆状细胞定为有功能的细胞，心肌细胞存活率=（长杆状细胞数量/全部细胞数量）×100%。1．5．3单个心肌细胞收缩功能的测定把培养的各组心肌细胞置于心肌细胞收缩功能分析装置的细胞浴槽中［3］，用蠕动泵将含有不同浓度的Ca2+和ISO的KH液循环至细胞槽内，然后用刺激器（0.5Hz，37℃）对细胞进行刺激。选择横

7、纹清晰、胞膜完整、长杆状的心肌细胞进行分析。1.6统计学处理应用SPSS13.0软件分析，数据以x±s表示，2组间均数比较采用t检验，多组间比较用单因素方差分析，检验水准：α=005。2结果2．1血流动力学变化与正常组比较，心衰组收缩压(SP)和舒张压(DP)升高，心室内压变化速率(±dp/dt)的绝对值下降(P0.05)。表明模型制作成功。表1血流动力学测定结果2．2正常和心衰大鼠心肌细胞的存活率心肌细胞培养24h后，正常组心肌细胞存活率为（80.67±3.33）%，高于心衰组心肌细胞的（63.50±3.73）%（P0.0

8、1）。2．3正常和心衰大鼠心肌细胞收缩幅度在不同浓度Ca2+刺激下（表2），心衰组心肌细胞收缩幅度都较同浓度正常组降低（P0.01）。随着Ca2+浓度增高，正常组和心衰组心肌细胞收缩幅度都增强（P0.01）。在不同浓度ISO刺激下（表3），心衰组心肌细胞收缩幅度均较同一浓度正