p16、 ki67在宫颈病变中的表达及意义

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1、P16、Ki67在宫颈病变中的表达及意义王佩飞陈建武黄巨丹陈良英【关键词】P16Ki67宫颈病变表达宫颈癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤,占妇女恶性肿瘤的首位,其发病率有逐年上升和发病年轻化的趋势,对宫颈癌的早期诊断、早期治疗,尤其在癌前病变人群中发现癌变的高危个体,开展针对性较强的重点预防,降低宫颈癌的发病率和死亡率,具有重要意义。本次研究采用免疫组化方法检测P16基因、Ki67抗原在宫颈上皮内瘤变(cervicalintraepithelialneoplasia,CIN)和宫颈鳞癌组织中的表达情况,探讨与宫颈癌发生发展的关系。报道如下。1 资料与

2、方法1.1 一般资料 收集乐清市人民医院2004年6月至2008年10月间宫颈活检、宫颈Leep术及子宫全切标本100例,患者年龄28~65岁,平均年龄(42.12±3.12)岁。其中CINⅠ~Ⅲ级患者70例,年龄28~60岁,平均年龄(42.20±3.61)岁;鳞癌30例,年龄30~65岁,平均年龄(41.93±3.08)岁;20例患者正常宫颈黏膜来自子宫平滑肌瘤的手术切除标本,年龄32~70岁,平均年龄(42.60±3.50)岁。三组的年龄差异均无统计学意义(P均>0.05)。1.2 方法 全部组织经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,4um厚连

3、续切片,免疫组化染色采用EnVision二步法,DAB显色,以PBS缓冲液(0.01mol/L,pH7.4)代替第一抗体作阴性对照,用已知阳性组织切片作阳性对照。所用单克隆抗体P16、Ki67、EnVision试剂盒及DAB显色剂均由Dako公司生产。操作按EnVision试剂盒说明进行。1.3 结果判定 根据Dako公司产品说明,P16阳性为胞核和/或胞浆着色,无棕黄色颗粒者为(-);棕黄色细颗粒为(+);棕黄色粗颗粒为(++);棕褐色粗颗粒为(+++)。Ki67阳性为胞核着色,阳性细胞仅位于基底层及副基底层或阳性细胞数≤5%者为(-);阳性细胞

4、数6%~25%者为(+);26%~50%者为(++);>50%者为(+++)[1]。本次研究以阳性强度在(+)以上者列为阳性表达。1.4 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件。计量资料以均数±标准差(■)表示。计数资料采用卡方检验;相关关系的分析采用Pearson积差相关分析法。设P<0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 P16、Ki67在宫颈各组病变组织中的表达比较结果见表1由表1可见,鳞癌组和CIN组的P16、Ki67阳性率与对照组比较,差异均有统计学意义(χ2分别=45.97、46.40、45.97、51.73,P均<0.05);

5、CINⅡ、CINⅢ组的P16、Ki67阳性率与CINⅠ组比较,差异均有统计学意义(χ2分别=12.50、10.29、9.52、7.78,P均<0.05)。2.2 宫颈CIN组与鳞癌组中P16、Ki67表达的相关性见表2由表2可知,经Pearson积差相关分析法分析,P16、Ki67在宫颈CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌组中表达呈正相关(r=0.51,P<0.05)3 讨论目前认为,宫颈癌尤其是鳞癌的发生是一个从异型增生到原位癌,最后发展为浸润性癌的渐进过程。在此过程中,多个癌基因的激活和抑癌基因的失活起着重要作用。(责任编辑:admin) P

6、16基因是人们发现的第一个直接作用于细胞周期、抑制细胞分裂的基因,位于人类染色体9p21区,由三个外显子和两个内含子构成,长约8.5kb[2],是从细胞周期素依赖性激酶4(cyclin-depedentkinase,CDK4)结合相互作用的蛋白质的研究中被发现和分离出来的。若其编码基因因甲基化、缺失等原因使细胞内P16蛋白减少,会引起细胞周期调节紊乱,使细胞无限制增生,甚至癌变,因此,P16被认为是一个抑癌基因。但进一步研究却发现,宫颈癌的发生及发展并不涉及P16基因甲基化或缺失,在57%的宫颈癌病例中存在P16基因的高表达,且会随着宫颈癌病情的发

7、生发展而呈现逐渐升高的趋势[3]。本次研究结果显示,在正常宫颈组织中P16蛋白表达率极低,而在CIN组及鳞癌组中表达率明显增高(P<0.05),且随着病变组织学分级的增加,P16在宫颈CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ组阳性表达率呈升高趋势(P<0.05),提示P16的高表达与宫颈癌的发生、发展有密切关系。同时还发现,P16的表达有明显的分层现象,CINⅠ阳性细胞主要局限于鳞状上皮下1/3层,而CINⅡ、CINⅢ则超过上皮层的下2/3或达全层,据此可以对CIN病变进行更客观准确的分级,有较好的临床应用价值。因此,P16被认为是宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的具有敏感性和特异

8、性的标志物,可作为宫颈病理和宫颈细胞学诊断的补充检查[4],并有助于对CIN病人的转归及宫颈癌病人预后的判断[5]。Ki6

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