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《重组腺相关病毒介导的人凝血因子ix基因在人-鼠结肠癌上皮细胞中的表达》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、重组腺相关病毒介导的人凝血因子IX基因在人/鼠结肠癌上皮细胞中的表达作者:马泳泳,陈方平,杜建伟,陈焱,彭建强,吴小兵,解勤之【摘要】目的:探讨重组腺相关病毒/人凝血因子IX基因(rAAV-2/hFIX)在人/鼠结肠癌上皮细胞(Sethods:rAAV-2/GFPan/ratgutepithelialcells,theexpressionofGFPeasured.rAAV-2/hFIXan/ratgutepithelialcells.TheexpressionsofhFIXetersofDNA,protEinandbiologicalactivity.Results:(57.0±8.5)%S
2、AN公司产品;DYY-6B型稳压稳流电泳仪为北京六一仪器厂产品;紫外透射仪、天能GIS凝胶图像处理系统GIS3.03为上海天能科技有限公司产品;TGL-16G型台式离心机为上海医用分析仪器厂产品;DYADTMDNAEnginePCR仪为美国MJResearch公司产品;ELISA仪为ELx800BIO-TEKInstruments.Inc产品。1.2病毒和细胞株病毒rAAV-2/GFP和rAAV-2/hFIX由病毒基因工程国家重点实验室吴小兵教授惠赠。rAAV-2/GFP,滴度为5×1011v.g/ml,纯度大于98%。rAAV-2/hFIX,滴度为1×1012v.g/ml,纯度大于98%。
3、pSNAV1GFP/FIX载体质粒由GFP/FIXcDNA正向插入通用型AAV载体质粒pSNAV1的克隆位点构建而成,rAAV-2/GFP病毒的包装、纯化、滴度及纯度的测定按2.4SOI下转染效率是不同的,在MOI为10:1时,三种原代细胞上皮的转染效率分别是23%、47%、85%。本实验的MOI1×105v.g/cell时,S].北京:人民卫生出版社,2003:1708-1719.[3]ChooKH,GouldKG,ReesDJ,etal.Molecularcloningofthegeneforhumananti-haemophilicfactorIX[J].Nature,1982,299
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