资源描述：
《蛋白酶体抑制剂mg132对pc12细胞的增殖抑制作用论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、蛋白酶体抑制剂MG132对PC12细胞的增殖抑制作用论文蔡同建，陈景元，李妍，季爱玲，杜可军，骆文静【关键词】蛋白酶体抑制剂；PC12细胞；帕金森病；细胞凋亡【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectofproteasomeinhibitorMG132ontheproliferationandapoptosisofdopaminergicPC12cells.METHODS:PC12cellssastainingandfloetry.RESULTS:Treatedforasameperiod（3d）,thein
2、hibitoryeffectofMG132onPC12cellproliferationenhancedentoftheconcentrationofMG132（0,1,2.5,5,10,20μmol/L）.Theinhibitoryrateexceeded40%ol/L,andthe50%inhibitingconcentration（IC50）ol/L.MG132alsoinducedtheapoptosisofPC12cellsobviously.TheapoptosisindexofthecellstreatedbyMG132at
3、2.5μmol/Lfor3dinedbyGiemsastainingand25.6%byfloetry,thatofthecontrolcellsinergicPC12cellsandleadtoapoptosis.Thedisfunctionofproteasomemaydoharmtotheexistenceofdopaminergiccells.【Keyeinhibitor;PC12cells;Parkinsondisease;apoptosis【摘要】目的：了解蛋白酶体抑制剂MG132对多巴胺能细胞PC12增殖和凋亡的影响.方法：
4、用不同浓度的MG132处理PC12细胞3d，通过3（4，5二甲基噻唑2）2.freelol/L），对PC12细胞增殖的抑制作用逐渐增强.当MG132浓度达到2.5μmol/L时，对PC12细胞的抑制率超过40%,IC50＝3.78μmol/L.同时，MG132能够明显诱导PC12细胞凋亡：姬姆萨染色显示，浓度为2.5μmol/L的MG132作用3d，细胞凋亡率为24.7%，而对照为1.3%；流式细胞术分析结果表明，浓度为2.5μmol/L的MG132作用3d，细胞凋亡率为25.6%，而对照为0%.结论：蛋白酶体抑制剂MG132能够抑制多巴
5、胺能细胞PC12的增殖并诱导细胞凋亡，蛋白酶体活性的丧失可能影响到多巴胺能细胞的生存.【关键词】蛋白酶体抑制剂；PC12细胞；帕金森病；细胞凋亡0引言帕金森病（parkinsonsdisease,PD）是最常见的神经系统退行性疾病之一，严重危害患者身体健康和降低患者的生活质量［1-2］.PD的病因和发病机制至今不够明确.越来越多的证据表明，多巴胺能神经元内蛋白质的损伤和功能异常蛋白的蓄积在散发性PD的发病过程中起着重要的作用［3］.蛋白酶体是一种多价复合酶，分布于细胞质与细胞核内，是哺乳动物细胞中主要的中性蛋白水解酶，在泛素蛋白酶体通路（
6、ubiquitinproteasomepatha公司）；6孔培养板（丹麦NUNC公司）；NU2500E型CO2孵箱（英国FormaScientif公司）；酶联免疫检测仪（江苏国营华东电子管厂）.1.2方法1.2.1PC12细胞的培养与传代细胞在加入100mL/L小牛血清,100U/mL青霉素的DMEM培养液中，37℃,.freelL/LCO2常规培养.待细胞长满至培养瓶底面积80%之后传代.1.2.2细胞毒性试验（MTT法）取对数生长期的细胞，接种于96孔板中.第2日换含有MG1320,1,2.5,5,10和20μmol/L的培养液，继续
7、培养3d，加入MTT（5g/L,20μL/孔），继续培养4h，终止培养，小心吸弃培养孔内上清液，每孔加入150μL的二甲基亚砜（DMSO），振荡摇匀，使MTT产生的蓝色结晶充分溶解，在酶标仪上以波长490nm测定各孔A值.细胞增殖抑制率按照下式进行计算（对照组为0剂量组，实验组为不同浓度MG132作用组）：IR（%）=（A对照组-A实验组）/A对照组×100.1.2.3姬姆萨染色法观察取对数生长期的细胞，常规爬片.24h以后，分别以正常培养液和加入MG1322.5μmol/L的培养液继续培养3d，然后进行Giemsa染色.染色方法：0.0
8、1mol/LPBS清洗玻片3～5次；利用卡诺固定液（甲醇∶冰醋酸＝3∶1）固定20min；用新配制的Giemsa染色液染色20min；自来水流水冲洗，二甲苯透明，光镜下观察染色效果，并拍照.结
