蛋白酶体抑制剂MG132与顺铂联合应用对肺癌A549细胞凋亡的影响.pdf

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1、·338·中华实验外科杂志2014年2月第3l卷第2期ChinJExpSurg，February2014，VoL．31，No2·实验研究·蛋白酶体抑制剂MG132与顺铂联合应用对肺癌A549细胞凋亡的影响韩玉杰赵松杨洋刘东雷吴恺【摘要】目的观察蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂(DDP)应用对肺癌A549细胞凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9和核转录因子一KB(NF—KB)表达的变化。方法采用细胞计数试剂盒(CCK_8)法检测30~mol／LMG132和／或20mg／LDDP对肺癌A549细胞抑制率的影响；Hochest33342染色观察细胞的形态变化；流式细

2、胞术(FCW)检测细胞凋亡率；采用Westernblot法检测细胞中NF—KB、Caspase-9蛋白的表达。结果CCK一8检测结果显示MG132与DDP能有效抑制细胞的增殖，呈浓度及时间依赖性。流式细胞术检测显示，MG132+DDP联合用药组凋亡率为(65．43±1．09)％．与MG132组的(23．23±0．96)％和DDP组的(24．86±0．40)％比较，细胞凋亡率明显提高(P<0．05)。Westernblot法结果显示联合用药组较单用药组细胞凋亡相关蛋白Caspase-9表达明显增强，核转录因子NF—KB表达显著减少。结论MG132与DDP联合应用可明显提高细胞凋亡率，其机

3、制可能是通过降低细胞NF—KB的表达，并提高Caspase一9的表达而实现的。【关键词1肺癌A549细胞；MG132；顺铂；核转录因子一KBTheefectofapoptosisinductionbyproteasominhibitorMG132combinedwithcisplatininlungad-enocarcinomacelllineA549HanYujie，ZhaoSong，rangyⅡ，“Donglei，Kai．DepartmentofThoracicSurgery，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity；theenK

4、eyClinicalMedicalEx—perimentaZLaboratoryInstituteofHenanProvince．Zhengzhou．450052，inaCorrespondingauthor：ZhaoSong，Email：zhaosong@zzu．edu．cn【Abstract】ObjectiveToobservethechangeoftheexpressionoftheapoptosis—relatedfactorCaspase-9andnuclearfactor—KB(NF—KB)ofproteasomeinhibitorMG132combinedwithcisp

5、latin(DDP)onlungadneocarinomacelllineA549．MethodsInhibitionratesofthelungadenocarcinomacelllineA549intervenedby30t~mol／LMG132and／or20mg／LDDPweretestedbycellcountingKit．8(CCK一8)．ThemorphologicalchangesofcellsweredetectedbyHochest33342staining．Thecellsapoptosisrateswereexaminedbyflowcytometry+Thec

6、hangesofexpressionoftheapoptosis—relatedfactorsCaspase-9andNF—KBweremeasuredbyWestemblottinganalysis．ResultsCCK一8showedthattheMG132orDDPcaneffectivelyinhibittheproliferationofcellsinadoseandtime—dependentmanner．Theflowcytometry(FCM)showedthattheapoptosisrateofcellstreatedwithMG132andDDP(65．43±1．

7、09)％wasobvi—ouslyinereasedthanthatalonelytreatedwithMG132(23．23±0．96)％orDDP(24．86±0．40)％．ComparedwiththegrouptreatedMG132orDDP，Theexpressionoftheapoptosis—relatedfactorCaspase一9ofthecombininggroupwassignificantlyup—regulated