蛋白酶体抑制剂mg132对人结肠癌hct116细胞增殖和凋亡的影响

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1、蛋[J酶体抑制剂MG一132对人结肠癌HCT-116细胞增殖和凋产的影响中义摘嘤蛋白酶体抑制剂M6-132对人结肠癌HCT-116细胞增殖和凋亡的影响中文摘要目的：研究蛋白酶体抑制剂MG一132对体外培养的人结肠癌HCT一116细胞株增殖和凋亡的影响，并初步探讨其作用机制，为结肠癌的药物治疗提供依据。方法：采用不同浓度的(0．5一15umol／1)MG-132和阴性对照组作用于人结肠癌HCT-116细胞株，应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吸光度值，计算对照组和各实验组细胞的生长抑制率；应用流式细胞仪(FCM)研究MG-132对

2、人结肠癌HCTll6细胞株细胞周期和凋亡的影响，计算细胞凋亡率；应用RT—PCR方法检测对照组和不同药物浓度组作用于人结肠癌HCT一116细胞后bcl一2、p27、caspase一3mRNA表达水平的变化；应用WesternBlot法检测细胞bcl一2、p27、caspase一3在蛋白水平的表达情况。结果：(1)MTT法显示不同药物浓度组均可抑制HCT-116细胞的生长，呈时间和剂量依赖性，实验组与对照组及各实验组之间差别均有统计学意义(P

3、CT-116细胞均出现凋亡，可见细胞周期S期明显抑制，且随着浓度的增加HCT一116细胞周期GO／G1期比例增加，S期细胞比例下降，差异有统计学意义(P

4、而增加，bcl-2蛋白表达随YlG一132浓度增加而下降(P

5、殖和凋主堕影．堕EffectsofproteasomeinhibitorMG-132ontheproliferationandapoptosisofHumanColonCancerHCT-116cellAbstractObjective：ToinvestigatetheeffectofproteasomeinhibitoroncellproliferationandapoptosisofhumancoloncancercelllineHCT-116．alsotoexploreitspossiblemechanismsofanti

6、-cancereffects．Methods：Invitro，humancoloncancercelllineHCT-116wastreatedbyproteasomeinhibitor(MG一132)indifferentconcentrations．bymeansofMTTassay，theabsorbancevaluewasdetectedandgrowthinhibitionratewascalculated．Cellcycleandapoptosiswereassessedbyflowcytometry(FCM)：Th

7、echangesofcellmorphologywereobservedbyinvertedandconfocalmicrocope．ThemRNAexpressionsofbcl-2、p27、caspase-3wereanalyzedbyreversetranscriplasepolymerasechainreaction(RT-PCR)．WesternBlotwasusedtodetectbcl-2、p27、caspase-3proteinexpression．Results：(1)MTTassayindicatedthat

8、theinhibitoryeffectofMG一132ontheproliferationofHCT．．116cellWasfoundindose-and-timedependentmanner．Therewasgreatstatisticalsignifica