高效液相色谱法测定小败毒膏中咖啡酸的含量论文

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1、高效液相色谱法测定小败毒膏中咖啡酸的含量论文赵艳波李春来孙冬梅【摘要】目的：建立小败毒膏的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：AgilentTechnologiesZORBAXExtend-C184.6×250mm,5μm，流动相：甲醇-0.01mol·L-1磷酸二氢钠溶液（23：77），流速：0.8ml·min-1，检测波长：323nm，柱温：40℃。结果：咖啡酸在1.00～40.00μg范围内线性关系良好（r=0.9996）；平均加样回收率为97.8%，RSD=1.3%（n=6）。结论：该方法简便易行，结果准确可靠，可适用于小败毒膏的质量控制。【

2、关键词】高效液相色谱法小败毒膏咖啡酸含量测定DeterminationofPaeonolcontentinXiaobaiduelectuarybyHPLC【Abstractobjective】TosetupamethodforqualitycontrolofXiaobaiduelectuary.Method:HPLCmethodination.COLUMNAgilentTechnologiesZORBAXExtend-C184.6×250mm,5μm.Themobilephaseethanol-0.01mol·L-1sodiumdihydrogenphospha

3、te(23:77).Thecolumntemperature,flol·min-1.Result:Thepaeonolaverageofrecoveryrateethodissimple,accurateandsuitableforitsassaying.【Keyination小败毒膏为《卫生部药品标准》第八册（中药成方制剂）收载的品种.freelm,5μm；流动相：甲醇-0.01mol·L-1磷酸二氢钠溶液（23：77）；检测波长：323nm；流速：0.8ml·min-1；柱温：40℃。2.2溶液制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取在110℃干燥至恒重的咖啡

4、酸对照品适量，加甲醇制成0.1000mg·ml-1的对照品贮备液；再精密量取对照品贮备液适量，加甲醇制成20.00μg·ml-1的对照品溶液，即得。2.2.2供试品溶液的制备取约2g，精密称定，置烧杯中，加水3ml，置水浴温热并搅拌使溶散，加硅藻土2g，拌匀，置100℃烘箱中，烘干，转移至50ml具塞锥形瓶中，并用水3ml洗涤烧杯及玻棒，洗液并入锥形瓶中，置100℃烘箱中，烘干，精密加5%甲酸的甲醇溶液10ml，密塞，摇匀，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用5%甲酸的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得2。2.2.3阴性对照溶液的制

5、备取除蒲公英以外的处方中其余药材的十分之一量，按法制成膏剂，再按供试品溶液制备方法，制成阴性对照溶液。2.3专属性试验分别精密吸取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。由图1可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间（咖啡酸10.169min）的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。2.4线性关系考察精密吸取咖啡酸对照品贮备液（浓度：0.1000mg·ml-1）适量，分别置于10ml量瓶中，加甲醇定容，配成浓度分别为1.00、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00μg·ml-1的溶

6、液6份，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤。精密吸取续滤液各10μl，注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积（A）为纵坐标，其浓度（C）为横坐标，经线性回归得回归方程为：A=2.58×108C-3.29×104，r=0.9996（n=6），结果表明，咖啡酸在1.00～40.00μg·ml-1范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系。2.5精密度和稳定性试验精密吸取咖啡酸对照品溶液（20.00μg·ml-1）10μl，在上述色谱条件下重复进样5次，求得咖啡酸溶液峰面积的RSD为0.5%，表明精密度较好。取同一供试品溶液，在0、4、8、12、24h分别进行测定，结果表明咖啡酸

7、对照品溶液在24h内稳定，RSD为0.7%（n=5）。2.6重复性试验取供试品（批号061011），共5份，分别按“2.2.2供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液，进行测定，求得咖啡酸含量的RSD为1.1%，表明重复性较好。2.7加样回收率试验精密称取已知含量的样品（批号061011，咖啡酸含量68.10μg·g-1）适量，共6份，分别置具塞锥形瓶中，分别精密加入咖啡酸对照品贮备液（0.1000mg·ml-1）各1ml，按“2.2.2供试品溶液的制备”方法操作，得回收率试验溶液，依法测定，结果见表1。2.8样品含量测定分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl

8、，注入液相色谱仪，测定3