同型半胱氨酸的检测和临床应用

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1、同型半胱氨酸的检测和临床应用郑秋金莆田学院附属医院检验科，福建莆田351100[摘要]同型半胱胺酸对于患有心、脑血管病疾病患者的治疗诊断具有极强的指导作用。大量.jyqkol/L，女性的同型半胱氨酸平均浓度为7.2μmol/L，年龄越大同型半胱氨酸水平越高，肾功能损害会直接的影响含硫氨基酸的排出，而硫氨基酸对同型半胱氨酸有转化的作用，所以含硫氨基酸无法排出也会导致血浆中的同型半胱氨酸浓度过高[6]。3同型半胱氨酸检测对患者产生的影响在临床上，检测同型半胱氨酸的应用主要在于诊断心血管疾病。目前我国的心血管疾病以及脑血管疾病的发病率和死

2、亡人数呈逐年上升的趋势，其和恶性肿瘤成为了影响我国人群身体健康的主要疾病，所以怎样降低心血管和脑血管的发病率和死亡率成为了医学界的一大难题，而同型半胱氨酸的浓度含量过高是冠状动脉粥样硬化以及心肌梗塞的重要危险指标，其浓度和危险性成正比关系，所以检测同型半胱氨酸的浓度对于诊断和治疗心血管和脑血管有极其重要的作用，研究同型半胱氨酸浓度能够为提高治疗的成功率，降低病死率有积极的影响[7-8]。4同型半胱氨酸的检测4.1HPLC检测法HPLC检测法所采用的技术绝大多数采用的是柱前衍生化荧光检测技术，这主要是因为同型半胱氨酸在血液中的存在形式

3、是多样化的，使得在标本的采集上和处理上都需要较高的要求，如对采集的抗凝血液需要及时的进行分离出血浆。在HPLC检测方法中，Pastore等人提出的衍生化方法较为简便，在处理上和操作上更加简便，采用Pastore等人提出的衍生化方法，整个过程都在高效液相自动加样器中进行。其步骤如下：先将含有氢氧化钠、硼氢化钠和二甲基亚砜的溶液，1-辛醇，盐酸溶液以及含EDTA与二巯基苏糖醇溶液一起加入到收集的标本当中，然后在室温下进行搅拌1min，然后在混合液中再加入含有衍生化剂bromobimane缓冲液，再进行1min的搅拌，然后进样。进样时的色

4、谱柱选择150mm×4.6mm反相C18柱，在进样前先利用pH为3.6的甲酸铵和硝酸铵对缓冲液进行平衡，接着再利用乙腈进行梯度洗脱，如果是半胱氨酸则保留时间为3.76min，如果是同型半胱氨酸则保留4.14min。采用该检测方法的优势在于操作简便，灵敏度很高，其最低的检测限可以达到50nmol/L，其线性范围相关系数也能够超过0.99，批间和批内不精密度分别可以达3.3%和4.9%（n=10），该方法还具有分离效果佳，能够分离出多种的含硫氨基酸，此外，该方法还能够检测尿液标本[9]。4.2荧光偏振免疫检测荧光偏振免疫检测法即FPIA

5、法，FPIA法是一种检测速度快、灵敏度高的检测方法，该方法理论上的检测速度能够达到每小时检测20个标本，但是其检测的成本较高，价格较贵，使得FPIA法在短时间内无法得以推广和普及。其主要的检测步骤如下：先利用二巯基苏糖醇将结合型同型半胱氨酸先还原，再利用一种特异的异性S腺苷同型半胱氨酸合成酶将同型半胱氨酸进行催化，催化为S腺苷同型半胱氨酸，将之和显示跟踪物荧光素标记的S腺苷同型半胱氨酸类似物共同和特异性的单克隆抗体进行综合性的结合竞争，从而使跟踪物产生一定的偏光性改变，进而得到同型半胱氨酸的浓度[10]。4.3酶转换免疫检测法采用循

6、环酶法测定同型半胱胺酸，仪器选取贝克曼AU5821型号的全自动分析仪，检测试剂盒和配套校准品宁波美康诊断公司生产。首先将同型半胱胺酸的标准也按照浓度进行梯度取样，浓度分别设定为：1.0、2.0、4.0、16.0、32.0、64.0umol/L的稀释液，对这些浓度的同型半光氨酸进行测定取平均值。采用循环酶法测定主要是利用酶底物，并以此来放大靶物质，此种测定方法具有反应温和、特异性较好、无污染、灵敏度较高等优势。此法可以有效的提升荧光和发光分析的灵敏度，值得临床的应用和推广。5同型半胱氨酸的临床应用由于同型半胱氨酸的代谢机理，其主要是在

7、代谢过程中N-5、10-亚甲基四叶酸还原酶或者是胱硫醚-B-合成酶等可造成同型半胱胺酸增高。同型半胱胺酸在代谢的过程中需要维生素B6和B12，传统理论认为同型半胱胺酸浓度是维持B6和B12的重要指标[11]。人们在饮食过程中对于B6和B12摄入量不足则可能导致同型半胱胺酸增高，为了维持患者体内的维生素B6和B12的含量，就必须加强营养治疗，通过饮食方法降低患者体内的同型半胱胺酸的含量，可以减少心脑血管疾病的潜在危险性，同时还能够通过降低同型半胱胺酸的含量而减少死亡率。经过相关的临床研究，血浆之中的同型半胱胺酸浓度下降程度，每下降3u

8、mol/L就可使得缺血性心脏病的危险比例减少16%，脑卒中危险率降低24%，静脉血栓危险率降低25%。根据美国疾病控制中心数据统计得出，补充叶酸可能减少心血管死亡人数188000人，脑卒中的死亡人数减少325000人[12]。因此同型