桦褐孔菌石油醚提取物的抗肿瘤作用研究

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1、桦褐孔菌石油醚提取物的抗肿瘤作用研究【摘要】目的探讨桦褐孔菌石油醚提取物（InonotusObliquusPetroleumetherExtracts,IOPE）抗肿瘤作用。方法体外实验采用MTT法测定了IOPE对Hela肿瘤细胞的抑制率。体内实验，将接种S180肿瘤细胞后的小鼠随机分为5组，每组10只，给予IOPE10d，停药后24h处死动物，称体重，摘出肿瘤，测定肿瘤抑制率、脾指数、胸腺指数、淋巴细胞转化率、NK细胞活性。结果在体外，IOPE对Hela肿瘤细胞具有毒性作用；体内实验表明中大剂量IOPE对荷瘤小鼠肿瘤生长具有抑

2、制作用，可增加脾指数及胸腺指数，对体外淋巴细胞转化功能和NK细胞活性亦有增强作用。结论桦褐孔菌石油醚提取物具有明显的抗肿瘤活性。【关键词】桦褐孔菌石油醚提取物抗肿瘤　　TheExperimentalStudyonAntitumorEffectofPetroleumEtherExtractsofIonontusObliquus　　　Abstract：ObjectiveTostudytheantitumoreffectofpetroleumetherextractsofInonotusObliquus(IOPE).MethodsIn

3、vitrotest,thetumorinhibitoryeffectstoHelacellsethod.Invivo,themiceorcellsanddividedinto5groupsrandomly(n=10),inisteredIOPE10dcontinuously.Themiceinistration,andtheinhibitionratioofthetumorusindex,transformationfunctionoflymphocyteandNKcellactivitiesorcells.TheIOPEcou

4、ldincreasethelevelsofinhibitionratiooftumorusindexinmiceandincreasethetransformationfunctionoflymphocyteandNKcellactivitiesinvitro.ConclusionTheIOPEhasobviousantitumoreffect.　　KeyetherExtractsofInonotusobliquus(IOPE)；Antitumor桦褐孔菌Inonotusobliquus是一种大型真菌，主要分布于北纬45～50°

5、的地区，如俄罗斯西西伯利亚、远东地区、中国黑龙江、吉林省长白山地区等。作为一种民间草药，桦褐孔菌在俄罗斯等国家已有很长的使用历史。近年的研究也表明，它在抗肿瘤、抗HIV、治疗糖尿病等方面都具有一定的潜力［1～5］。成分研究表明，桦褐孔菌低极性提取物中含有大量的三萜类化合物，主要为羊毛甾醇、桦褐孔菌醇及其衍生物。本文通过体内和体外实验对桦褐孔菌中石油醚提取物抗肿瘤方面的作用及机理进行了研究。　　1材料与方法　　1.1药品的制备桦褐孔菌子实体购自大连王力灵芝行，由江苏省药用植物生物技术重点实验室郑维发教授鉴定，样品保存于江苏省药用植

6、物生物技术重点实验室。将桦褐孔菌子实体称重、粉碎后用石油醚加热萃取多次，过滤。滤液经浓缩干燥后得到桦褐孔菌石油醚提取物，记为IOPE。　　1.2动物与试剂　　1.2.1动物及瘤株　　昆明种ICR小鼠，体重为（20±2）g，徐州医学院实验动物中心提供，合格证号：苏动200402。自由摄食饮水，室温（25±2）℃。S180肉瘤细胞、Hela人宫颈癌细胞、K293人胚肾细胞，由中国科学院遗传与发育研究所提供。　　1.2.2试剂MTT，美国Sigma公司产品；DMSO，美国Sigma公司产品；注射用环磷酰胺，江苏恒瑞药业股份有限公司产品

7、，生产批号040221；生理盐水，徐州远恒药业有限公司产品，生产批号04121311；RPMI1640培养基、RPMI1640完全培养基，美国GIBCO公司产品；PBS溶液实验室自制。　　1.3方法　　1.3.1IOPE对肿瘤细胞的抑制实验［6］　　分别取对数生长期的Hela细胞及K293细胞（1×105/ml）接种于96孔培养板中，150μl/孔，然后加入50μl不同浓度的IOPE，总体积200μl/孔，药品的终浓度为0，50，100，200，300，500g/ml，每组均设6个样本孔。在37℃，5%CO2、饱湿条件下培养72

8、h，以MTT比色法测吸光度并计算药物对肿瘤细胞的抑制率和对K293细胞的生长促进率。　　1.3.2IOPE对小鼠S180肉瘤的抑制作用实验［7］　　取传代后7d的S180肉瘤细胞悬液（2×106），每鼠右后腋窝皮下接种0.2ml。次日随机分组，每组10只，于接种