桦褐孔菌的活性成分研究

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1、STUDYONTHEACTIⅦ玳GI冱DIENTOFINONOTUSOBLIQUUSADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeof—MasterofMedicineByMaiQinOinSupervisor：Prof．HanGuangAssociateProf．XuMeiMay,2014’～一嘲关于学位论文独创声明和学术诚信承诺～本人向河南大学提出硕

2、士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文申不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料．与我一同5-作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。学位申请人(学位论文作者)签名：丧钐劲201{p年歹RhB关于学位论文著作权使用授权书本人经河南大学审核批准授予硕士

3、学位．作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留、使周学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文(纸质文本和电子文本)以供公众检索、查阅．本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文(纸质文本和电子文本)。(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)学位获得者(学位论文作者)签名：表弼钐201学位论文指导教师签名：201月厶日少专月，多日摘要桦褐孔菌Inonotusobliq

4、uus(Pers．：Fr．)Pilat为多孔菌科的药用真菌，分布于北半球450～500的地区，我国以黑龙江、吉林两省资源较为丰富。民间用于治疗一些恶性肿瘤。目前桦褐孔菌的化学成分主要以三萜类成分为主，此外还有甾类、多糖类、木质素类以及小分子芳香类化合物等。已有大量药理学实验证明，桦褐孔菌具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、降血脂、降血糖及保肝等广泛的药理作用。目前，有关桦褐孔菌(Inonotusobliquus)化学成分的系统性研究还不够深入，且对于其中微量的化学成分的活性评价尚不全面，此外，单体化合物的药理作用研究目前多局限于

5、体外实验。借于此，本实验进行了桦褐孔菌的活性成分研究。本论文采用95％乙醇对桦褐孔菌(Inonotusobliquus)进行回流提取，并依次用石油醚、乙酸乙酸、正丁醇萃取；将萃取物分别采用硅胶柱色谱、ODS开放柱色谱、SephadexLH．20柱色谱、半制备HPLC进行化学成分的分离，共分离得到了14个化合物；并根据理化性质及1H-NMR、13C-NMR、APCI．MS、DEPT、HSQC、HMBC等波谱数据鉴定了化合物的结构，分别为lanosterol(1)、inotodiol(2)、3fl-hydroxy—lano

6、sta-8，24一diene一21一al(3)、inonotsuoxideA(4)、inonotsuoxideB(5)、trametenolicacid(6)、lanosta-8，23E-diene-3p,22R,25-triol(7)、betulinicacid(S)、3,3,28一dilly&oxylup-20(29)-ene(9)、olelanolicacid(10)、4-(3，4·dihydroxyphenyl)-(E)-3-buten-2一one(11)、(22E，24S)一5a，8a—epidioxy一24

7、-methyl—cholesta-6，9(11)，22-trien-3,8-01(12)、8-epidioxy-5a，8a-ergosta一6，22E-dien一3fl-01(13)、3#-hydroxylanosta-7，9(11)，24-trien一21．oicacid(14)。这14个化合物中有8个为四环三萜类，3个五环三萜类，2个甾类化合物，1个酚类化合物。经检索，其中化合物10、12和14为首次从该药用真菌中分离得到。体外实验采用MTT法对分离得到的化合物1．10、12．14对人结肠癌HT-29、人宫颈癌He

8、la两种肿瘤细胞株的抗肿瘤活性进行了初步评价，活性筛选结果表明，对人结肠癌HT-29细胞株，化合物5表现出中等的细胞毒活性，ICso值为22．27pM，化合物2、4、8、12、13表现出比较弱的细胞毒活性，ICso值分别为50．3l、31．99、59．72、30．76、58．23pM，而其余的化合物均未表现出细胞毒活性，IC50值