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1、对4039例妇女HPV感染情况的调查与分析论文【摘要】目的了解义乌地区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染的分布情况，确定本地区的优势型别。方法采用流式荧光杂交法对4039例妇女进行26种HPV基因型检测，分析宫颈病变中HPV亚型感染分布特点。结果在被调查的4039例妇女中HPV感染总阳性率为16.4%（661/4039），感染亚型从高到低依次为：16、52、58、33和18，感染率为：16亚型占18.9%；52亚型占16.8%；58亚型占12.5%；33亚型占7.8%；18亚型占6.7%。结论本地区HPV
2、亚型感染分布以16、52、58、33型为主。【关键词】人乳头瘤病毒宫颈癌人乳头瘤病毒（humanpapillomavrius,HPV）是一种具有种属特异性的嗜上皮病毒，属双链闭环的小DNA病毒，大量流行病学研究已证实，HPV的感染与子宫颈癌的关联最为密切.freelinex100(美国Luminex公司)。HC-2试剂盒(美国Digene公司)。基因杂交信号放大系统DML2000(美国Digene公司)。1.2方法1.2.1抽提DNA：按试剂盒说明进行。1.2.2PCR扩增：扩增HPVDNA的引物是MY0
3、9／MYll的改进型，引物为生物素标记，扩增靶区为HPVLI区，产物长度约480bp。此外，还包括扩增人B-珠蛋白编码基因的引物，用于特异性扩增人p-珠蛋白DNA片段。加抽提后的DNA50-100ng到主混合液(MasterMix，含dNTP、M92+、引物混合液、Taq酶、双蒸水)。扩增条件为95℃5min；以下为5个循环：95℃30s，58℃30s，72℃30s；再接35个循环：95℃30s，55℃30s，72℃30s；最后：72℃3min。1.2.3杂交检测：将编码微球与DNA探针混合(探针浓度10
4、umol／L，10ul微球原液)；向检测板的每孔中加入微球-探针杂交液22ul、PCR产物3ul；PCR仪中99℃变性5min，48℃30min使探针-扩增产物结合；向每孔中加入75ul链霉亲和素标记的藻红蛋白(SA-PE)，48℃孵育15min；Luminex多功能流式分析仪检测。表14039例女性年龄分布与HPV感染检出率的关系注：各年龄组的阳性检出率用X2检验，X2=80.87P0.01,查差异有统计学意义表2HPV高危亚型检出例数分布情况2结果2.1从表1中可知，本研究共检测4039例样本，其中阳
5、性病例661例，阳性检出率为16.4%，41-45岁年龄段的阳性百分比最高为16.3%，形成一个最高峰；而56-60岁阳性检出率最高，为36.8%,明显超过平均检出率，说明阳性检出率随着研究病例年龄段的增长，呈现出一种上升的趋势。从表1可以看出各年龄段HPV感染检出率差异有显著性，具有统计学意义。2.2从表2中可知，本研究的4039例样本中HPV感染的阳性病例中，主要以16亚型为主，占18.9%，其次为52亚型，占16.8%，再次为58亚型，占12.5%3讨论宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤之一，其发病率仅次于乳
6、腺癌位居第二位4。HPV是一种诱发女性宫颈癌及生殖器病变的主要病源体。在超过95%的早期浸润和浸润性宫颈癌中，至少发现20种致癌HPV亚型。现已明确HPV感染是宫颈上皮瘤变和浸润性宫颈癌发生的重要原因。临床HPV检测对于发现宫颈癌高危患者早期防治有着重要意义。流式荧光杂交法采用多重PCR技术对检测样品的核酸DNA进行扩增，并用包被有核酸探针的多种编码微球和扩增产物进行杂交，结果用流式点阵仪检测分析。多重PCR可有效扩增ed,2004.128(1):17-22.5Oikaangene,humanorprog
7、ressionJ.CancerRes,2004.64(5):3545-3549.6HoGY,BiermanR,BeardsleyL,etal.NaturalhistoryofcervicalvaginalpapillomavirusinfectioninyoungenJ.NEnglJMed,1998.338(7):423-428.7SunZR,JiYH,ZhouongeninLiaoningprovince,ChinaJ.IntJGynaecolObstet,2010.109(2):105-109.8孙丽
8、君,娄雪玲,王东红等.贵州省部分地区妇女宫颈人乳头瘤病毒感染现状调查及分析J.中国综合临床,2009.25(9):923-927.9张晓静,袁瑞,代红莹.重庆永川地区妇科门诊人乳头瘤病毒亚型分布的研究J.重庆医科大学学报,2010.35(9):2.
