雌、孕激素对et1诱导的心肌细胞肥大反应的影响论文

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1、雌、孕激素对ET1诱导的心肌细胞肥大反应的影响论文【摘要】目的观察不同浓度的17β雌二醇（E2）和孕酮（P）单独及联合运用对内皮素1(ET1)诱导的心肌细胞肥大反应的影响。方法以ET1刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞，建立心肌肥大细胞模型，以心肌细胞［3H］亮氨酸（3Hleu）掺入作为心肌肥大反应的指标。结果E2可明显抑制ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入的增加，而P对此无显著作用；E2/P联合运用时，P对E2降低ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的作用具有一定程度的抑制作用。结论E2可抑制ET1诱导的心

2、肌细胞肥大反应，E2/P联合使用时，P可一定程度的抑制E2对心肌的保护效应，应用时应以低浓度为宜。【关键词】17β雌二醇孕酮心肌细胞肥大反应【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsof17βestradiol(E2)orprogesterone(P)aloneandbinedE2/Ptreatmentoncardiomyocytehypertrophyinducedbyendothelin1（ET1）.MethodsMyocardialcellsfromneonatalrats

3、yocytehypertrophymodelyocytehypertrophicresponseentent,Pcouldeextent.ConclusionE2caninhibitcardiomyocytehypertrophyinducedbyET1.EM培养基购自Gibco公司，HEPES购自生工生物工程（上海）有限公司，新生小牛血清为Hyclone产品，3Hleu为中国原子能科学研究所产品，其余均为国产分析纯。1.3主要实验仪器Eppendorf高速离心机（centrifuge5417型，德国），78HEM培养液培养

4、24h，加或不加不同浓度（10-10～10-6mol/L）的E2、P预处理24h，再加入10-8mol/L的ET1作用24h后，每孔加入37kBq/ml的3HLeu继续孵育16h，移去培养液，用10％的三氯乙酸0.5ml4℃固定30min，再用预冷的DHank’s液清洗两遍，最后用含1％SDS的0.2mol/L的NaOH溶液0.5ml裂解细胞，37℃孵育12h后收集裂解液于含有8ml闪烁液的测量杯中，摇匀放置在液体闪烁仪上测定放射性强度。1.6统计学处理数据以均数±标准差（x±s）表示，以t检验和单因素方差分析作统计学处理

5、，P＜0.05为有统计学意义。2结果2.1ET1对心肌细胞形态的影响用胰蛋白酶消化分离的新生SD大鼠心室肌细胞在培养72h后，加入ET1（10-8mol/L），24h后，心肌细胞呈现明显的肥大（图1）。a.正常心肌细胞b.肥大心肌细胞图1ET1诱导的肥大心肌细胞(×200)2.2E2预处理对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响与对照组相比，10-8mol/LET1可使心肌细胞3Hleu掺入增加（88.67±15.05）％（n＝6，P＜0.01）；该作用可被E2预处理24h后明显抑制，10-10～10-6mo

6、l/LE2分别使ET1处理的心肌细胞3Hleu掺入下降，详见表1，其中以10-8mol/LE2作用最为明显；单独给予E2对心肌细胞3Hleu掺入没有显著影响（n＝6，P＞0.05）。表1不同浓度E2对ET1诱导的心肌细胞3Hleu注：与空白对照组比较*P＜0.01；与ET1组比较#P＜0.012.3P预处理对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响与对照组相比，10-8mol/LET1可使心肌细胞的3Hleu掺入增加（94.48±27.18）％（n=6,P＜0.01）；10-10～10-6mol/LP预处

7、理24h对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入的增加无显著影响，详见表2。表2不同浓度P对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响注：与空白对照组比较*P＜0.012.4E2与P联合运用对ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加的影响为了探讨E2/P联合应用对心肌肥大反应的影响，我们进一步以10-10、10-8、10-6mol/L的E2降低ET1诱导的心肌细胞3Hleu掺入增加作为对照，分别观察了10-10、10-8、10-6mol/L的E2与10-10、10-8、10-6mol/L的P联合运用时对心肌细胞3H

8、leu掺入的影响。结果发现，与对照组相比，10-8mol/LET1可使心肌细胞的3Hleu掺入增加（76.92±23.30）％（n=6,P＜0.01）；该作用可被E2预处理24h后明显抑制，10-10、10-8、10-6mol/LE2分别使心肌细胞3Hle