大黄、虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型孕激素及其受体的影响论文

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1、大黄、虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型孕激素及其受体的影响论文朱丽红，胡婷婷，严维娜【摘要】目的研究大黄、虫对大鼠子宫肌瘤模型孕激素及其受体的影响。方法将70只SD大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、大黄虫小剂量组、大黄虫中剂量组、大黄虫大剂量组、大黄虫丸组、桂枝茯苓胶囊组，采用雌孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型，放射免疫法测定大鼠血清孕激素(P)水平，免疫组织化学染色观察大鼠子宫平滑肌细胞孕激素受体(PR)的表达。结果模型大鼠血清中P水平，子宫平滑肌细胞PR的表达明显高于正常大鼠,大黄虫可降低血清中

2、P水平，抑制平滑肌细胞PR的表达。结论P及PR在子宫肌瘤生长中起重要作用.freelentalratsyomas.Methods70femaleSprague-Dalydividedinto7groups:controlgroup,modelgroup,loediumdosagegroupofDaHuangandZheChong，higherdosagegroupofDaHuangandZheChong，DaHuangZheChong-2000)全自动计数，按试剂盒要求测定血清孕激素(P)水平。分别在双侧宫

3、角最大直径及宫颈处取材3块，脱水、石蜡包埋、HE染色。按试剂盒说明进行SP法免疫组化染色。读片参照Forml-1正常对照958.72±24.16模型1082.24±12.73b大黄虫小剂量974.48±9.87大黄虫中剂量1066.66±15.42c大黄虫大剂量1072.91±11.84大黄虫丸1060.31±22.51d桂枝茯苓胶囊959.46±20.74d与正常对照组比较,aP0.05,bP0.01;与模型组比较,cP0.05，dP0.01图3不同实验组对大鼠孕激素水平的影响从表1及图3可见，与正常大鼠

4、比较，模型组血清孕激素明显升高。与模型组比较，大黄虫3个剂量组可不同程度的降低大鼠血清中孕激素水平，以大黄虫中剂量组有明显统计学差异(P0.05)。大黄虫丸、桂枝茯苓胶囊对大鼠血清孕激素水平也有显著抑制作用(P0.01)。3.4不同实验组对孕激素受体(PR)的影响见表2及图4～5。表2不同实验组对大鼠孕激素受体的影响从表2以及图4～5中可见，孕激素受体(PR)阳性细胞核内呈现棕黄色颗粒。正常组大鼠子宫平滑肌部位PR阳性细胞呈少量、散在分布(图5a);模型组大鼠子宫平滑肌PR阳性细胞密度明显增强，其阳性信号表

5、达呈强阳性(图5b)，与正常组比较，二者阳性表达率有极显著差异(P0.01);大黄虫3个剂量组(图5cde)、大黄虫丸组(图5f)及桂枝茯苓胶囊组(图5g)大鼠子宫的PR阳性细胞密度明显降低，与模型组有极显著差异(P0.01)。4讨论子宫肌瘤是临床常见病、多发病，病因及发病机理十分复杂，涉及机体局部或整体雌、孕激素及其受体的变化、局部多肽生长因子、细胞分裂率的改变及体细胞突变等许多方面，其中卵巢激素依赖性已达成共识。我们采用外源性雌、孕激素负荷法建立子宫肌瘤模型。子宫大体各项指标如子宫湿重、子宫指数(子宫湿

6、重/大鼠体重)、宫颈及宫体最大直径等均明显大于正常大鼠;HE染色显示其子宫平滑肌层出现局灶性增生，平滑肌排列紊乱，细胞增大，病理改变与子宫肌瘤病理组织学结构类似，说明造模成功。从20世纪70年代以来，中医治疗子宫肌瘤的学术探讨日趋活跃。经方治疗是最早使用并得到持续关注的治疗方法。结合历代对“癥瘕”的认识，我们认为，子宫肌瘤属癥积范畴，是实质包块，瘀血内阻是其病机关键，因此治宜破血消癥。大黄、虫对药组合出自《金匮要略》下瘀血汤、大黄虫丸等名方，大黄破积导滞、泻火凉血，行瘀通经;虫破血逐瘀，通络理伤。虫入肝经，

7、走血分而化瘀血，大黄入血分而逐瘀血。二药配伍，相互促进，破血逐瘀，消癥散结之力大增。该对药组合善治瘀血导致的闭经、癥瘕(子宫肌瘤、卵巢囊肿、肝脾肿大等)、产后血瘀腹痛等5。本研究从经方对药入手，探讨活血化瘀治则对孕激素及其受体的影响。结果显示，大黄虫中剂量组血清孕激素较模型组显著降低，小、大剂量组无明显差异，说明大黄虫降低雌、孕激素的作用与大黄虫丸、桂枝茯苓胶囊作用相似。大鼠子宫平滑肌细胞PR的免疫组化染色结果也显示，正常组PR阳性表达率显著低于模型组，大黄虫用药组平滑肌细胞与模型组相比，PR蛋白含量明显下

8、降。表明肌瘤局部PR的含量增高是其局部高激素水平和细胞增殖的主要原因。所以大黄虫治疗子宫肌瘤的机理都可能与降低体内孕激素及其平滑肌细胞受体含量有关。总之，从经方中挖掘关键对药组合研究子宫肌瘤者未见报道，本研究方案作为经方研究的新切入点，旨在筛选特效组合，为大黄、虫的临床疗效提供实验依据，并为进一步提取有效成分获得单体奠定基础。【