资源描述：
《l_精氨酸_no途径抑制血管紧张素_诱导的心肌细胞肥大反应》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2008Oct;24(10):1361～5·1361·L2精氨酸2NO途径抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大反应121杨涛,张伟,张雷(河北医科大学1.组织学与胚胎学教研室;2.基础部药理学教研室,河北石家庄050017)中国图书分类号:R2332;R322111;R329124;R345157;酶(nitricoxidesynthase,NOS)的催化下,生成一氧R392111;R542120213;R97713;R97714化氮(nitr
2、icoxide,NO)。后者对心肌肥大具有明显文献标识码:A文章编号:1001-1978(2008)10-1361-05的抑制作用,但具体机制尚不清楚。寻找分子信号摘要:目的探讨L2精氨酸(L2arginine,L2Arg)对心肌细胞转导的调控机制是揭示病理性心肌肥大形成与消退血管紧张素Ⅱ受体(angiotensinⅡreceptor,ATR)及丝裂原机制的关键。丝裂原活化蛋白激酶家系成员丝裂原活化蛋白激酶(mitogen2activatedproteinkinase,MAPK)表达活化蛋白激酶(mitogen2a
3、ctivatedproteinkinase,的影响,进而阐述L2Arg对病理性心肌肥大的影响作用及相MAPK)是目前发现的最主要的生长信号调节蛋白关机制。方法用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ATⅡ)、之一,大量研究显示MAPK参与多种病理性刺激介ATR抑制剂、L2Arg和(或)L2NAME(L2硝基精氨酸甲酯)分[2]别作用于心肌细胞,然后以[3H]2亮氨酸参入法检测细胞蛋导的心肌肥大反应。本实验利用培养的心肌细白合成速率、比色法检测一氧化氮(NO)生成量、RT2PCR及胞,探讨ATⅡ对心肌细胞的效应及该
4、过程受到L2Westernblot检测ATR及p38MAPK的表达水平。结果①Arg的影响时ATR与p38MAPK的表达变化,来阐给予L2Arg可缓解ATⅡ引起的心肌细胞NO合成量下降,减明ATR的两种不同亚型和p38MAPK在病理性心弱血管紧张素Ⅱ21型受体(angiotensinreceptortype1,ATR1)肌肥大形成过程中的作用及L2Arg对心肌肥大作用表达及下调p38MAPK蛋白磷酸化水平,并降低心肌细胞蛋的分子机制,从而为临床上对心肌肥大的治疗提供白合成速率给予ATⅡ或L2Arg均未影响血管紧张素
5、Ⅱ22受新的思路和实验依据。体(angiotensinreceptortype2,ATP2)的表达水平;②心肌1材料与方法ATR1表达水平及p38MAPK蛋白磷酸化水平均与NO合成1.1材料量之间存在线性负相关。多元逐步回归分析显示在ATR11.1.1实验动物14～16wk,♂,近交系Sprague2与ATR2中,仅ATR1的表达水平与p38MAPK蛋白磷酸化水平之间存在回归关系。结论①L2Arg可致心肌细胞NODawley大鼠,体重180～220g,由河北医科大学实验合成量增加,后者可抑制ATR1介导的p38MA
6、PK蛋白磷酸动物中心提供。化水平上调,进而抑制心肌细胞肥大反应;②ATR2未参与1.1.2主要药品与试剂L2Arg(分子量17412)、上述过程。ATⅡ(分子量104612)、L2NAME(分子量26917)以关键词:L2精氨酸;一氧化氮;血管紧张素受体;丝裂原活化及Saralasin(分子量912105)均购自Sigma公司;蛋白激酶;心肌肥大ATR1、ATR2引物由Invitrogen公司合成;ATR1、ATR2及p38MAPK免疫印迹法(Westernblot)检测近来发现在心脏中存在相对独立的肾素-血管试剂
7、盒亦购自Invitrogen公司;NO检测试剂盒由紧张素系统(renin2angiotensinsystem,RAS),当心脏3BoehringerMannheim公司提供;[H]2亮氨酸购自受到病理性刺激时,局部RAS活化,随后所产生的中科院上海原子能研究所。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ATⅡ)能够与相应的1.2方法ATⅡ受体(angiotensinⅡreceptor,ATR)相结合,从[1]1.2.1离体心肌细胞的培养采用出生后1～3d而发挥出生长因子样作用。通过ATⅡ及ATR表[3]3的Sprag
8、ue2Dawley大鼠,将左心室剪成1mm碎达量的相继改变,级联激活后续的多种信号转导激块,胰酶消化后,磁力搅拌消化5min后,吸出上层酶,最终促进DNA转录而使心肌肥大形成。细胞悬液,加入等体积含胎牛血清的M199培养液L2精氨酸(L2arginine,L2Arg)可在一氧化氮合以终止消化,离心,收集细胞。相似地,反复消化8收稿日期:2008-01-24,
