hplc法测定阿莫西林颗粒剂的含量及有关物质论文

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1、HPLC法测定阿莫西林颗粒剂的含量及有关物质论文洪建文李趣嫦王彦蝶【摘要】目的建立阿莫西林颗粒剂中阿莫西林的含量测定及有关物质检查的方法。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH值5.0）乙腈（体积比97.5∶2.5）为含量测定的流动相；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH值5.0）乙腈（体积比99∶1）为流动相A，0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH5.0）乙腈（体积比80∶20）为流动相B，梯度洗脱检查有关物质，检测波长230nm，柱温30℃，流速1.0mL/min。结果阿莫西林分别在0.1～1mg/mL(r=0.9999，n=

2、7)与0.049～0.0012mg/mL(r=0.9998.freel之间进行紫外扫描，结果阿莫西林在230nm波长处有最大吸收，同时杂质在230nm也有较大响应。因此选择230nm为本法的检测波长。2.2含量测定2.2.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L的氢氧化钾调节pH值至5.0）乙腈（体积比97.5∶2.5）为流动相，流速为1.0mL·min-1，检测波长为230nm，柱温30℃，进样量20μL。色谱结果见图1。A.对照品;B.样品图1阿莫西林颗粒剂含量测定的HPLC色谱图（略）Figure1HPLCofamoxic

3、illin2.2.2溶液的制备对照品溶液：精密称取阿莫西林对照品适量，加流动相制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液：取装量差异项下的内容物，研细，精密称取粉末适量，加流动相溶解并定量稀释成每1mL含0.5mg的溶液，滤过，取续滤液，即得。2.2.3专属性试验取空白辅料按“2.2.2”项方法制备溶液，进样测定。结果表明空白辅料对样品测定无干扰。将供试品在60℃温度下放置10d，于第10天取样，按“2.2.2”项方法制备溶液，进样测定。结果表明本品经高温加速实验后，杂质总数和总量均有所增加，主成分与各种分解产物完全分离。将供试品在相对湿度92.5%（KNO3饱和溶液），温

4、度35℃下放置10d，于第10天取样，按“2.2.2”项方法制备溶液，进样测定。结果表明本品经高湿加速实验后，杂质总数和总量均有所增加，主成分与各种分解产物完全分离。色谱图见图2。A.空白辅料;B.高温降解;C.高湿降解;1.阿莫西林图2阿莫西林专属性试验HPLC色谱图（略）Figure2HPLCofamoxicillinforselectivitytest2.2.4线性关系考察精密称取阿莫西林对照品适量，用流动相溶解并稀释成含阿莫西林0.09947、0.1989、0.3979、0.4973、0.5968、0.7958、0.9947mg/mL的溶液，按“2.2.1”项下的色谱条件

5、进行测定，以质量浓度（ρ）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，得线性回归方程为A=29328ρ-6.7868，r=0.9999（n=7）。结果表明，阿莫西林质量浓度在0.1～1mg/mL范围内与峰面积线性关系良好。2.2.5精密度试验取同一批供试品（批号17374）1份，按“2.2.1”项下的色谱条件连续进样5次，其峰面积的平均值为16025.6，RSD为0.04%（n=5），表明方法精密度良好。2.2.6稳定性试验取同一供试品溶液分别于配制后0～8h内按“2.2.1”项下的色谱条件进行测定，记录峰面积，结果阿莫西林的峰面积RSD为0.1%，表明溶液在8h内稳定。2.2.7重复性试验

6、取同一批样品（批号17374）6份，分别按“2.2.2”项方法制备溶液，进样测定，计算得阿莫西林的平均含量为104.1%，RSD为0.6%（n=6），表明分析方法重复性良好。2.2.8回收率试验称取空白辅料，分成9等份，3份为１组，分别精密加入一定量的阿莫西林对照品，充分混合均匀，置50mL量瓶中，按“2.2.2”项方法制备溶液，进样测定，计算回收率。结果阿莫西林平均回收率为100.0%，RSD=0.2%，表明本方法准确可靠。2.2.9检测限在“2.2.1”项的色谱条件下，当阿莫西林对照品进样浓度为0.05μg/mL时，记录的色谱峰峰高约为基线噪音3倍，根据进样量20μL计算，阿

7、莫西林的检测限为1ng。2.3有关物质2.3.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用2mol/L的氢氧化钾调节pH值至5.0）乙腈（体积比99∶1）为流动相A，0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH5.0）乙腈（体积比80∶20）流动相B，先以流动相A流动相B(体积比92∶8)等度洗脱，待阿莫西林峰洗脱完毕后按以下程序进行线性洗脱（见表1）,流速为1.0mL/min；检测波长230nm；柱温30℃；进样量20μL。色谱分离结果见图3。