分析基质金属蛋白酶及其抑制因子联合检测对宫颈癌复发的预测价值

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1、分析基质金属蛋白酶及其抑制因子联合检测对宫颈癌复发的预测价值游泳1杜莹莹1曹媛2李真珍2张胜军21.郑州大学第一附属医院妇产科，河南郑州450052；2.河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室，河南郑州450052[摘要]目的分析联合检测基质金属蛋白酶及其抑制因子联预测宫颈癌复发的价值。方法选取宫颈癌首次术后的标本118份，分为复发组48例和未复发组70例。采用SABC法行免疫组化检测标本MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2因子阳性表达率和表达强度。同时，选取同期正常宫颈组织标本3

2、0例为对照组。比较各组相关因子表达情况差异。结果复发组中MMP-2和MMP-9的阳性率(81.3%和79.2%)和表达强度(99.86±23.67和97.53±23.14)显著高于未复发组(48.6%和51.4%，69.75±15.86和72.16±16.01)和对照组(10.0%和6.7%，28.12±9.48和33.97±11.14)，TIMP-1和TIMP-2的阳性率(39.6%和43.8%)和表达强度(60.48±14.03和62.75±14.63)显著低于为未复发组(68.6%和71.4

3、%，84.93±19.86和88.86±20.15)和对照组(90.0%和93.3%，105.62±24.24和108.74±24.87)(P<0.05)。未复发组中MMP-2和MMP-9的阳性率和表达强度显著高于对照组，TIMP-1和TIMP-2的阳性率和表达强度显著低于对照组(P<0.05)。结论MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2联合检测可作为评估宫颈癌复发的重要指标。.jyqkatrixmetalloproteinase，MMPs)是一种蛋白水解酶，其主

4、要作用为降解细胞外基质，在肿瘤的发生、侵袭转移中发挥重要作用，其抑制物(tissuinhibitorofmatrixmetalloproteinase，TIMPs)与MMPs结合，特异性抑制MMPs活性[2]。目前，已有文献对MMPs/TIMPs在宫颈癌中的表达情况进行报道[3]，但有关MMPs和TIMPs联合检测对宫颈癌复发的预测价值的研究较少。该研究选取2005年3月—2011年2月间该院收治的宫颈癌患者118例，分析了复发宫颈癌患者MMP-2、MMP-9及其抑制剂TIMP-2、TIMP-1表

5、达情况，旨在探讨MMPs和TIMPs联合检测对宫颈癌复发的预测价值，现报道如下。1资料与方法1.1一般资料选取该院诊治的宫颈癌患者首次术后病理标本118份。根据术后随访情况（3年内疾病是否复发），将患者分为复发组和未复发组。复发组48例：年龄35～75(61.5±6.06)岁；肿瘤大小0.5～7.6(3.4±1.4)cm；组织学分级：G17例、G213例、G328例；FIGO标准分期：Ⅰ期13例、Ⅱ期35例；组织学类型：鳞癌41例、腺癌7例。未复发组70例：年龄33～74(60.2±6.13)岁；

6、肿瘤大小0.5～6.9(3.2±1.3)cm；组织学分级：G112例、G220例、G338例；FIGO标准分期：Ⅰ期21例、Ⅱ期49例；组织学类型：鳞癌57例、腺癌13例。同时，选取正常宫颈组织标本30例为对照组，年龄32～65(53.5±5.1)岁。所有患者术前均未接受过化疗、免疫、冷冻、放疗和激光等治疗，所有标本均经病理学确诊。复发组和未复发组患者在年龄、肿瘤大小、分期、分级和组织类型方面差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。1.2方法1.2.1主要试剂即用型鼠抗人TIMP-2和TIM

7、P-1多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)；HIGH-SABC试剂盒；即用型鼠抗人MMP-2和MMP-9免疫组化试剂盒；DAB显色试剂盒。1.2.2实验方法各组患者组织标本均采用SABC法进行免疫组化检测，操作严格按照试剂盒说明书进行。取两组患者病变组织标本1份；对照组任取宫颈组织1份。经甲醛固定、脱水、石蜡包埋处理。厚度4μm连续定向切片，处理后用于免疫组化染色和HE染色。主要步骤[4]：①脱蜡、水化、PBS洗涤；②蒸馏水洗涤、抗原修复、PBS洗涤；③滴加山羊血清，室温20min；④滴加Ⅰ抗

8、，室温60min，PBS洗涤；⑤滴加Ⅱ抗，25℃20min，PBS洗涤；⑥滴加SABC试剂，25℃20min，PBS洗涤；⑦DAB显色，蒸馏水洗涤；⑧脱水、透明、封片。用已知的免疫组化染色阳性的宫颈切片作阳性对照，用磷酸盐缓冲盐液代替一抗作阴性对照。1.2.3结果判定由两位医师观察切片后共同判断；阳性表达：以细胞膜或细胞浆出现棕黄色颗粒沉着为阳性。采用上海山富科学仪器有限公司提供的BiosensDigitalImagingSystemv1.6自动分析系统，测量切片肿瘤细胞阳性成分的