正交实验法优选鱼腥草胰蛋白酶抑制剂的提取工艺论文

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1、正交实验法优选鱼腥草胰蛋白酶抑制剂的提取工艺论文【摘要】目的研究鱼腥草中胰蛋白酶抑制剂活性成分的最佳提取条件。方法以提取液对胰蛋白酶的抑制率为指标,采用正交试验法对提取温度(A)、溶剂用量(B)、pH值(C)、提取时间(D)4个因素进行优选研究,并以优选出的提取方案进行验证实验。结果因素B对提取效果有极显著的影响,因素A、C均有显著的影响,因素D影响不显著。结论鱼腥草中胰蛋白酶抑制活性成分有效部位的最佳提取工艺为A1B2C3D2。【关键词】鱼腥草胰蛋白酶抑制剂正交实验Abstract:ObjectiveTooptim

2、izetheextractionprocedurefortrypsininhibitorfromHouttuyniacordataThunb..MethodsTheinhibitionrateoftrypsinactivityeter,ployedtheorthogonaldesignmethodtotesttheeffectsoffourfactors,includingtemperatureofextractionsolution(A),volumeofextractionsolution(B),pHvalueo

3、fextractionsolution(C)andtimeofextraction(D),ontheextractionoftrypsininhibitor.ResultsFactorBperformedthemostsignificanteffectontheextraction,andfactorsAandCcamethenextandfactorDthelast.ConclusionTheoptimumextractiontechnologyisA1B2C3D2eter.Keyl。表1因素水平(略)2.2鱼腥草

4、中胰蛋白酶抑制活性成分对胰蛋白酶的抑制率测定方法采用苯甲酰DL-精氨酸对硝基苯胺(BAPNA)法[7]:取胰蛋白酶液1ml,加药材提取液1ml在37℃水浴保温5min,加入BAPNA溶液5ml,37℃水浴保温10min后,立即加1ml三氯乙酸(30%)终止反应,用分光光度法在410nm条件下测定吸光度。按下列公式计算样品提取液的抑制百分率:i=(Ar-Abr)-(As-Abs)(Ar-Abr)×100%式中:i—抑制百分率;Ar—标准溶液的吸光度;Abr—含标准溶液的空白对照液的吸光度;As—样品溶液的吸光度;Abs

5、—含样品溶液的空白对照液的吸光度。3结果与方差分析结果见表2,表3。由方差分析可知,各因素对提取效果的影响程度依次为BACD,其中因素B为高度显著,因素A,C影响显著,因素D没有统计学意义,对试验结果的影响很小。由R值可知,各因素对试验结果的重要次序为BCAD。考虑到规模化生产中经济、效率等因素,本文优选工艺A1B2C3D2,即在60℃,用30倍量水,.freelithDA,Yarinoacidsequencesoftbuckistry,1997,43:327.[2]文方德,傅家瑞.植物种子的蛋白酶抑制剂及其生理功能

6、[J].植物生理学通讯,1997,33(1):1.[3]刘喜纲,刘翠哲.鱼腥草的药理作用研究进展[J].中华中西医学杂志,2004,9(2):13.[4]屈红丽,可钰,尹鹏,等.冬凌草中总黄酮提取工艺研究与含量测定[J].时珍国医国药,2006,17(10):1929.[5]游见明.大孔树脂分离鱼腥草总黄酮的研究[J].现代食品科技,2005,21(2):66.[6]刘永刚,陈玉娟,刘倩,等.中乌头次碱制备工艺的研究[J].时珍国医国药,2006,17(9):1622.[7]GodboleSA,KrishnaTG,B

7、hatiaCR.Purificationandcharacterizationofproteaseinhibitorsfrompiheonpea(Cajanuscajan(L.)Millsp)seeds[J].JSciFoodAgric,1994,64:87.

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