正交实验法优选参芪补血颗粒的提取工艺论文

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1、正交实验法优选参芪补血颗粒的提取工艺论文李晓晔，刘文星，米存云，裴军平，秦向阳【关键词】参芪补血颗粒；,,正交实验；,,高效液相色谱法；,,黄芪甲苷摘要：目的研究参芪补血颗粒剂的最佳提取工艺。方法选用L9（34）正交表设计实验，并以黄芪甲苷(C41H68O14)和干膏得率作为考察指标，考察乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间对提取效果的影响。结果参芪补血颗粒的最佳提取工艺为用65%的乙醇8倍量，回流提取3次.freelalextractivetechniquesofShenqibuxueGranules.Me

2、thodsL9（34）orthogonalexperimententsinextractivetechniques.Theyieldofastragaloside(C41H68O14)anddryextractconditionedextractingcrudedrugsfromalcohol.Moneover,inthelightofcontentindexes,fourfactorsmustbetakenintoconsideration:thefrequencyandtimeofextracting,th

3、equantityandconcentrationofalcohol.ResultsTheoptimalextractivetechniqueses,eachtimefor1.5h.ConclusionTheproposedmethodsresultingoodreproducibilityasalextractivetechniques.Keyent;HPLC;Astragaloside参芪补血颗粒是由黄芪、当归、制首乌、党参等6味中药组成的中药复方制剂。主要用于治疗贫血和放射、化疗时引起的白细胞、血小板减少

4、等血虚症。黄芪系方中君药，黄芪甲苷为其活性成分之一，对药物和放射所致白细胞和淋巴细胞降低具有明显的改善作用［1］，并且其稳定性好。因此，测定提取液中黄芪甲苷的含量可作为评价本制剂质量的客观指标之一，浸膏提取量也可作为有效成分提取率的指标。故为了发挥药物的最佳疗效，优化制备工艺，本文以黄芪甲苷含量为指标、结合浸膏得率，用正交实验法优选本制剂的最佳提取工艺，为工业化生产提供依据。1仪器与试剂DIONEXSummit680高效液相色谱仪(美国)：DIONEXP680HPLCPUMP，ThermostattedColu

5、mnpartmemtTCC-100，Alltech2000ES型ELSD、DIONEXChromenleonChromatographyManagementSystem；SK250LH型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；ZORBAXExtendC18（4.6mm×150mm，5μm美国安捷伦科技有限公司）色谱柱。黄芪甲苷对照品（0781200311）中国药品生物制品检定所；参芪补血颗粒由第四军医大学药物研究所和化学教研室研制；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂为分析纯。2方法与结果2.1高效液相色谱方法

6、的建立2.1.1色谱条件流动相乙腈水（32∶68）；流速：1.0mlmin-1；柱温：25℃；Alltech2000ES型ELSD；飘移管温度：100.6℃；气体流速：2.7Lmin-1；进样量：20μl；理论塔板数以黄芪甲苷峰计算大于5000。色谱图见图1。a-对照品b-供试品图1色谱图（略）2.1.2标准曲线的制备精密称取黄芪甲苷对照品12.5mg置于25ml容量瓶中，加入无水甲醇定容至25ml，配制为0.5mgml-1的黄芪甲苷对照品储备溶液。用移液管分别精密移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6

7、.0ml黄芪甲苷对照品储备溶液置10ml容量瓶中，加甲醇定容，分别得到浓度为0.05，0.10，0.15，0.20，0.25,0.30mgml-1的标准品溶液，用0.45μm微孔滤膜滤过，进样20μl在给定色谱条件下进行测定。以进样量的常用对数值（x）为横坐标，蒸发光峰面积的常用对数值（y）为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为：y=0.957+1.635x，r=0.9992，黄芪甲苷在1.0~6.0μg的范围内呈良好的线性关系。2.2提取方法的选择2.2.1醇提正交实验根据文献研究及预实验，设计提取工艺的正交实

8、验因素水平，结果见表1。表1因素水平表（略）根据因素水平表，选用L9（34）正交实验表进行实验（见表2）。每份称取参芪补血颗粒原药材36g，按正交表实验方案进行提取，提取液减压浓缩并用双蒸水定容到200ml的容量瓶中，超声溶解，以供测定两个检测指标的含量。2.2.2提取液中黄芪甲苷和干浸膏得率的测定提取液中黄芪：甲苷含量测定用移液管精密移取2.2.1项下定容到200ml的提取液50ml