正交实验法优选复方降脂灵的提取工艺的论文

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1、正交实验法优选复方降脂灵的提取工艺的论文作者：陈红红，郭姣，唐春萍，郭彤，何伟【摘要】　　目的优选中药复方降脂灵的提取工艺。方法采用正交实验法，以出膏率和提取液中齐墩果酸的含量为指标进行优选。结果复方降脂灵的最佳提取工艺为加水12倍量，提取3次，2h/次。结论对于出膏率，提取次数有显著性影响；对于齐墩果酸，提取次数、加水量和提取时间3个因素均无显著性影响。【关键词】复方降脂灵正交实验提取工艺齐墩果酸出膏率复方降脂灵(原名丹七降脂汤)为广东药学院郭姣教授临床经验方，主要由女贞子、白术、杜仲等8味中药组成，临床上在降血脂、降血糖和改善血流变等方面均有良好的作用。

2、其汤剂和粉末胶囊经临床、初步药效学研究，均证实疗效确切而无明显毒副作用［1］。女贞子是本复方中的君药，而齐墩果酸是女贞子的主要药效成分之一。齐墩果酸除了能用于治疗急性黄疸型肝炎、慢性迁延型与活动型肝炎和抗癌辅佐药物外，还具有降糖、降血脂、抗炎、抗病毒、抗衰老及增强免疫的作用［2］。通过水提取、90％乙醇提取、70％乙醇提取、半仿生提取和综合提取等不同提取工艺的药理学实验，结果表明以水提取法的药效为最好［3］。.水提取法工艺简单、成本低，而且药效好。为了研究水提取工艺的最佳条件，用正交实验法，以出膏率和齐墩果酸含量为考察指标，对水提取工艺条件进行优选，为生产提

3、供依据。　　1材料与仪器　　1.1材料女贞子、杜仲、大蓟、白术、田七等中药均购自广东省药材公司，经广东药学院生药学专家刘基柱老师鉴定为真品。　　1.2仪器与试剂t6紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；hh-6电子恒温水浴锅（苏州威尔实验用品有限公司）；gzx-9420mbe电热恒温鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）。齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供；香草醛（指示剂，天津市福晨化学试剂厂）；薄层层析硅胶h（层析用，青岛海洋化工厂）和羧甲基纤维素纳盐（cmc-na）800－1200为化学纯；其它试剂均为分析纯。齐墩果酸对照品使用液

4、：精密称定齐墩果酸对照品10mg，用三氯甲烷配制成浓度为0.2mg/ml的溶液。硅胶板的制备：称取硅胶h5g，放入研钵中，加入1％cmc-na溶液适量，调成糊状，均匀涂布于洁净的玻璃板(20cm×4cm)上，使其表面均匀光滑。于室温下晾干后，置于烘箱内加热活化，在温度105℃左右保持活化30min，然后放入干燥箱中保存，备用。　　2方法　　2.1工艺设计　　采用加热回流的提取方法，提取时选择了加水量、提取时间及提取次数3个因素，每个因素选取三个水平设计了正交实验方案，实验因素水平见表1。根据以上因素水平,选择l9(3)4正交设计表，按照正交实验表项下的实验条

5、件进行提取，用出膏率及齐墩果酸的含量作为考察指标，对水提工艺条件进行优选。　　2.2样品溶液的制备药材经60℃恒温烘30min，稍加捣碎，称取处方药材共64g。按正交实验表项下设计的实验条件以加热回流方式进行提取，合并水提取液。将上述提取液浓缩，定容至一定体积，制得样品溶液。表1提取实验水平因素（略）　　　2.3出膏率测定精密量取一定体积样品溶液，置于已干燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸发至近干，再放置烘箱于105℃烘3～4h，置干燥器中冷却至室温，精密称量质量，按下式计算出膏率。　　　出膏率（%）=g/ml的三氯甲烷溶液）0.1，0.2，0.3，0.4，0.5

6、，0.6ml（0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2mg），分别置于刻度离心管中，水浴挥干溶剂，各精密加入5％香草醛乙酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，混匀，置于70℃恒温水浴上加热15min，冷却至室温，精密加入醋酸乙酯4ml，摇匀。以试剂为空白，在555nm处测定吸光度值，结果见表2。并以吸光度a对对照品使用液体积v进行直线回归，得回归方程a＝0.9425v＋0.0052，r=0.9978。表2标准曲线测定数据（略）　　　2.4.2样品测定精密量取一定体积的样品溶液，浓缩成稠膏，干燥，称量质量。精密称取上述膏体10g于圆底烧瓶中，加入三氯甲烷3

7、0ml，70℃恒温水浴回流1h。用分液漏斗分出三氯甲烷层，于残渣中再加入三氯甲烷30ml，同样回流提取1h，合并三氯甲烷溶液，无水na2so4干燥，过滤，挥干溶剂，再用三氯甲烷定容至5.00ml，备用。用精密吸取样品溶液5μl，对照品溶液30μl点于同一硅胶板上，用三氯甲烷－甲醇－冰乙酸［5］（40∶1∶1）展开10cm，取出，挥干溶剂，再放入饱和碘蒸气缸中显色，定位后再挥去碘，将斑点分别刮入具塞刻度离心管中，各加入5％香草醛乙酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，混匀，同“2.4.1”标准曲线的制备项下操作。离心后取上清液于555nm处测定吸光度，同时做空白

8、实验（在硅胶板上刮取与样品斑点同样大小的空白硅胶进行