藏药打箭菊总黄酮的提取研究

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1、藏药打箭菊总黄酮的提取研究【关键词】打箭菊；,,芦丁；,,紫外分光光度法；,,总黄酮；,,正交设计　　摘要：目的研究打箭菊总黄酮的最佳提取条件。方法以芦丁为指标，用紫外分光光度法对打箭菊总黄酮的提取方法进行系统研究。结果乙醇回流提取法最好，且以50%乙醇按1∶50的料液比、在100℃回流提取3h的方法提取，得到的打箭菊中的总黄酮含量最高。结论打箭菊中总黄酮的最佳提取条件为B3C3A2D3。　　关键词：打箭菊；芦丁；紫外分光光度法；总黄酮；正交设计　　StudyonExtractionofTotalFlavonoidsinTraditionalTibe

2、tanDrugFlosPyrethriTatsienensis　　ZHANGDaoying,ZHANGLing*，XUHuaiyuan　　(JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang，Jiangxi330004，China)　　Abstract：ObjectiveTostudytheoptimumextractingconditionoftotalflavonoidsinFlosPyrethriTatsienensis.MethodsUsingRutinastheevaluatingc

3、riteria,theextractionconditionetry.ResultsTheoptimumextractingconditionumextractingconditiontatsienense(Bur.etFranch.)Ling(ChrysanthemumtatsienenseBur.etFranch.)的干燥头状花序［1］。生长于海拔3500～5000m的高山草坡或灌丛林缘，分布于青海、四川、云南、西藏及甘肃等地，为一种常用藏药，其藏名为“阿加塞窘”“塞窘美多”。性寒，味苦，无毒。具有活血、散瘀、祛湿、消炎、止痛功能，其藏名“塞窘”

4、就为解痛之意［2］。主要用于脑震荡、“黄水病”、瘟疫病、太阳穴头痛、跌打损伤和湿热疮疡。有　　2.1.4超声提取取打箭菊粉末约1g，精密称定，用乙醚回流脱脂预处理后，将粉末全部转移至250ml三角瓶中，加50%乙醇50ml，超声提取30min，过滤，其他操作同第1份。　　2.2总黄酮含量的测定　　2.2.1对照品溶液的制备精密称取120℃减压干燥至恒重的无水芦丁20.9mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇溶解(如不溶，置水浴上微热使溶解)，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得芦丁对照品溶液(每毫升含芦丁0.209mg)。　　2.2.2测定波长的选择及稳定性考

5、察取4个25ml容量瓶，1，2号分别加入2ml芦丁对照品溶液和1ml打箭菊溶液，各加甲醇稀释至刻度，以甲醇为空白，在紫外分光光度计上200～600nm波长范围内进行扫描。3，4号分别加入2ml芦丁对照品溶液和1ml打箭菊溶液，各加甲醇至6ml，再加0.5ml2%三氯化铝甲醇溶液(含1%冰醋酸)，用甲醇稀释至刻度，摇匀，放置60min，在200～600nm波长范围内扫描［5，6］。从吸收图谱上可以看出，用2%三氯化铝甲醇溶液(含1%冰醋酸)显色后，在紫外区，打箭菊的吸收峰发生了紫移，而芦丁的吸收峰发生了红移，但它们的最大吸收波长发生移动后都在274.6

6、0nm处。因此，可以确定274.60nm为测定波长。同时在274.60nm处进行时间扫描，显示在120min内显色很稳定。　　2.2.3标准曲线的制备精密量取芦丁对照品溶液0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml，分别置于25ml容量瓶中，各加甲醇至6ml，加入2%三氯化铝甲醇溶液（含1%冰醋酸）0.5ml，摇匀，再加甲醇至刻度，放置60min，以第1瓶中溶液作为空白，在274.60nm测定各溶液的吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，得回归方程：C＝0.0274A-0.0001，相关系数r=0.9999，其线性范围为0.0042～0.021

7、0mg/ml。　　2.2.4样品的测定精密吸取各供试品溶液1ml，然后照“标准曲线的制备”项下操作，测定吸收度，由回归方程换算成总黄酮浓度，并计算出打箭菊中总黄酮的含量。　　2.2.5结果比较比较结果可知，用回流提取法所得的溶液总黄酮含量最高，所以决定用回流提取法对打箭菊药材进行提取。　　2.3正交实验设计　　2.3.1考察因素及水平选择乙醇浓度、料液比、提取温度及提取时间4个因素，每个因素选择3个水平，编制L9（34）因素水平表［7］。见表1。　　表1L9（34）因素水平表（略）　　2.3.2正交实验方法取打箭菊粉末约14g，置索氏提取器中，用乙醚

8、回流脱脂至无色，乙醚提取液弃去，将粉末置干燥箱中60℃干燥1h，取出，放冷，分别称取9份，每份约1g，精密称