均匀设计法优选藏药打箭菊中木犀草素提取条件

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1、均匀设计法优选藏药打箭菊中木犀草素提取条件作者：张凌，张道英，金晨，江雁，关媛媛【摘要】目的优选藏药打箭菊中木犀草素的最佳提取条件。方法采用均匀设计实验，以高效液相色谱法测定木犀草素含量为指标，对影响木犀草素提取条件进行筛选。结果最佳提取条件为：用过5～6号筛的打箭菊粉末、加50倍量甲醇、水浴回流提取1h。结论打箭菊粉末粉碎度对木犀草素提取有较大影响。【关键词】打箭菊;木犀草素;均匀设计;高效液相色谱法　Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionproces

2、sofLuteolininFlosPyrethriTatsienensisofTibetanmedicine.MethodsTodeterminethecontentofLuteolinbyhomogeneousdesigntoscreentheconditionofextractingtheLuteolinfromFlosPyrethriTatsienensisbyHPLC.ResultsThebestextractionconditionswereasfollows:80-100headpow

3、der,50foldmethanol,reflux-extractingfor1hour.ConclusionThecomminutiondegreeofFlosPyrethriTatsienensishassignificanteffectinextractingtheLuteolinfromFlosPyrethriTatsienensis.8　　Keywords：FlosPyrethriTatsienensis;Luteolin;Uniformdesign;HPLC　　打箭菊，又名鞑新菊或川西

4、小黄菊，为菊科匹菊属(或小黄菊属)植物川西小黄菊Pyrethrumtatsienense(Bur.etFranch.)Ling[ChrysanthemumtatsienenseBur.etFranch.]的干燥头状花序[1]，生长于海拔3500～5000m高山草坡或灌丛林缘，分布于青海、四川、云南、西藏及甘肃等地，为一种常用藏药，其藏名为“阿加塞窘”“塞窘美多”。性寒，味苦，无毒，具有活血、散淤、祛湿、消炎、止痛功能，其藏名“塞窘”就为解痛之意[2]，主要用于脑震荡、“黄水病”、瘟疫病、太阳穴头痛

5、、跌打损伤和湿热疮疡。有文献报道，其主要含有木犀草素、木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷、洋芹素、芫花素等黄酮类成分[3]。本作者在前期对打箭菊总提物的药效学初步研究中得出其具有良好的抗炎镇痛作用[4]，本文采用均匀设计实验，以反相高效液相色谱法测定打箭菊中木犀草素含量为指标，探讨木犀草素提取影响因素，并筛选出最佳提取条件，为打箭菊中木犀草素提取条件和均匀设计法在中药提取条件优化中应用提供科学依据。　　1仪器与试药　　1.1仪器Agilent81100型高效液相色谱仪;1/10万电子分析天平(上海梅

6、特勒-托利多仪器有限公司);SB3200超声波清洗仪(上海博迅实业有限公司医疗设备厂);万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)　　1.2试药木犀草素对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号为111520-200201);打箭菊药材由西藏藏医学院提供;所用试剂为分析纯;流动相用乙腈、甲醇为色谱纯，水为双蒸水。　　2方法与结果　　2.1木犀草素的高效液相色谱分析方法[5]　　2.1.1色谱条件色谱柱为HypersilODS2(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.7%冰醋酸(25∶75)

7、，流速1.0ml/min，检测波长350nm，柱温30℃。理论塔板数以木犀草素计，应不低于2000。对照品色谱图见图1，样品色谱图见图2。图1对照品色谱图图2样品色谱图　　2.1.2对照品溶液的制备精密称取木犀草素对照品9.02mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配制成浓度为0.0902mg/ml的木犀草素对照品溶液，即得。8　　2.1.3线性关系的考察分别精密吸取木犀草素对照品溶液0，1，2，4，6，8，10ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，各进样10μl，记录色谱图，依

8、次测定峰面积，以峰面积(Y)对浓度(X)进行线性回归，得回归方程：Y=80.0+40856.1X，R=0.9993。结果表明，木犀草素在0～0.9020mg/ml范围内呈良好的线性关系。　　2.2单因素实验考察提取条件　　2.2.1不同提取时间的考察取打箭菊粉末(过6号筛)约3g，精密称定，置150ml平底烧瓶中，加入甲醇100ml，分别按不同时间回流提取，滤过，用甲醇充分洗涤残渣，合并提取液及洗涤液，置水浴上挥干，加甲醇溶解，并定量转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，过0.