不同dna干系倍体鼻咽癌细胞增殖活性的研究

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1、不同DNA干系倍体鼻咽癌细胞增殖活性的研究作者：王凤岩，夏潮涌，黄中新，唐海兰，覃莉，饶晓黎【摘要】目的研究不同DNA干系倍体鼻咽癌细胞核的增殖活性。方法鼻咽癌归档病例37例，要求每个病例包括正常鼻咽上皮组织和三个癌巢或肿瘤组织区域，免疫组化SP法进行PA与Ki-67染色，TIGER细胞图像分析仪分别检测每个癌巢或肿瘤区域的PA、Ki-67阳性表达率与DNA干系倍体。结果同一癌巢或肿瘤区域的DNA干系二倍体的PA与Ki-67阳性表达率与DNA干系异倍体相比差异无显著性（P＞0.05）。结论不同DNA干系倍体鼻咽

2、癌的细胞增殖活性相同。【关键词】DNA干系倍体；细胞增殖；鼻咽癌；PA；Ki-67StudytheproliferationofDNAdiploidyandDNAabnormalploidyinnasopharyngealcancercells【Abstract】ObjectiveTostudytheproliferationDNAploidyinnasopharyngealcellularnucleus.Methods37archivalcasesofnasopharyngealcarcinoma(NPC)a

3、ltissueand3cancernestsorregion(intotal111samples).TheexpressionofPAandKi-67inedbyimmunohistochemicalSPmethod，DNAstemploidyandthepercentofPA，ki-67positivecellnuclEiagineanalyzer.Resultsparedalploidyeorcarcinomaregion(P＞0.05).ConclusionTheprolifertionofDNAdipl

4、oidyandDNAabnormalploidyisequallyinnasopharyngeal.【Keyploidy；cellproliferation；nasopharyngealcarcinoma；PA；Ki-67肿瘤细胞DNA含量及其干系倍体与肿瘤复发、转移及预后密切相关，研究表明DNA干系异倍体肿瘤的细胞增殖活性明显高于DNA干系二倍体的［1～3］。鼻咽癌是我国南部省区特异高发的一种恶性肿瘤，在国外比较罕见，有关鼻咽癌DNA干系倍体细胞的增殖活性鲜见报道，本文通过TIGER细胞图像分析仪，对37例鼻

5、咽癌病例的DNA含量与干系倍体状况进行了分析，以PA、Ki-67的阳性表达率反映细胞增殖情况，研究不同DNA干系倍体鼻咽癌细胞的增殖活性。1材料与方法1.1病例来源与组织切片的制备暨南大学医学院附属第一医院1980～2000年鼻咽癌活检归档蜡块，术前均未进行放化疗，选择每个病例包括正常鼻咽上皮组织和三个癌巢或肿瘤区域，共37例，其中男29例，女8例，平均年龄49.1岁（18～82岁）。其中低分化鳞癌23例，泡状核细胞癌7例，未分化癌7例。每个病例制成4μm、8μm连续组织切片。1.2免疫组化染色及阳性表达率的计

6、算PA与Ki-67单克隆抗原均购自美国DAKO公司，其余试剂均购自北京中山生物技术有限公司。4μm组织切片采用SP法，微波修复，DAB显色，苏木素复染。以PBS代替一抗作为阴性对照；以淋巴结作为PA的阳性对照；以人乳腺癌作为Ki-67的阳性对照。使用TIGER细胞图像分析仪分别计数每个癌巢或肿瘤区域的阳性细胞核数与阴性细胞核数，计算每个癌巢或肿瘤区域的PA与Ki-67阳性表达百分率。1.3鼻咽癌细胞核DNA染色及其干系倍体的定量分析1.3.1Feulgen染色4μm、8μm连续组织切片各1张，二甲苯脱蜡15＇×

7、3.5MHCl室温水解1h，Schiff’s试剂室温染色1h。1.3.2细胞图像分析仪的校正使用显微测微尺标定TIGER细胞图像分析仪的几何标尺，使用中国计量科学院出产的标准密度片标定TIGER细胞图像分析仪的光密度。1.3.3鼻咽癌细胞核DNA含量及其干系倍体的定量分析(1)8μm组织切片上以核距法测量鼻咽正常上皮细胞核与肿瘤细胞核体积等参数，具体方法参见2.3鼻咽癌DNA干系倍体与细胞增殖状况的关系以DI判定DNA干系倍体状态，PA、Ki-67阳性表达率判定鼻咽癌细胞核增殖状态。DNA干系二倍体的PA、Ki

8、-67的阳性表达率与DNA干系异倍体比较差异均无显著性（P＞0.05）。表2不同DNA干系倍体的PA与Ki-67的阳性表达率(x±s)3讨论细胞在各种致瘤因素的作用下，基因发生突变，导致癌基因激活与抑癌基因失活及其编码产物的过度表达，使细胞在分裂增殖过程中出现染色体畸形、断裂、不分离以及基因扩增等，从而导致细胞核DNA的质或量发生异常改变，成为异常细胞群体。研究表明细胞核DNA含量与干