高效液相色谱法同时测定沙枣中槲皮素和异鼠李素的含量论文

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1、高效液相色谱法同时测定沙枣中槲皮素和异鼠李素的含量论文杜瑞芳,王雨梅刘卫东，马丽【摘要】目的建立沙枣中槲皮素（Quercetin）和异鼠李素（Isorhamin）的高效液相色谱测定方法。方法采用ODS柱，甲醇0.1%磷酸溶液（58∶42），检测波长370nm。结果槲皮素在0.042～0.84μg范围内线性关系良好，异鼠李素在0.0412～0.824μg范围内线性关系良好；该法回收率槲皮素为98.98％，异鼠李素为99.27％；RSD槲皮素为1.56％，异鼠李素为0.86％（n=6）结论该方法为沙枣的含量测定提供了一种快速和准

2、确的方法，为蒙药植物资源的进一步开发提供了可靠的依据。【关键词】沙枣槲皮素异鼠李素含量测定高效液相色谱法Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfordeterminationofquercetinandisorhamininFructusElaeagni.MethodsTheseparationedonKromasilC18Column(250mm×4.6mm,5μm)andthemobilephaseethanol-0.1%phosphoricacid(58∶42).Quercet

3、inandisorhamin.ResultsThestandardcurvein,respectively.Therecoveryin,respectively.ConclusionThismethodisrapidandaccuratefordeterminationofquercetinandisorhamin.ItcouldbeusedforfurtherexploitationofMongoliaherbalresources.Keyin；Assay；HPLC沙枣.freelasilC18色谱柱（250mm×4.6mm

4、,5μm，100A）；流动相：甲醇0.1％磷酸溶液（58∶42）；检测波长370nm；体积流量：1.0ml/min；柱温：室温；进样量：20μl。在此条件下供试品中槲皮素成分、异鼠李素成分能与其它成分达到较好分离。见图1。2.2对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品和异鼠李素对照品适量，加80％甲醇分别制成每毫升含槲皮素和异鼠李素200μg的溶液。精密量取上述对照品溶液各0.5ml，置10ml量瓶中，加80％甲醇制成每毫升含槲皮素和异鼠李素10μg的混合对照品溶液。2.3供试品溶液制备取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，

5、精密加80%甲醇50ml，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25ml，置具塞锥形瓶中，加25%盐酸溶液10ml，摇匀，置水浴加热回流30min，立即冷却，转移至50ml量瓶中，用适量80%甲醇洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加80%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.4标准曲线制备取槲皮素对照品和异鼠李素对照品各约10mg，精密称定，分别置不同的50ml量瓶中，用80％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。各精密量取10.0ml置25ml量瓶中，加80％甲醇至刻度

6、，摇匀，即得对照品混合溶液。精密量取对照品混合溶液0.25，0.5，1.0，2.0，5.0ml置于10ml量瓶中，80％甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样20μl测定峰面积。以对照品峰面积Y为纵坐标，相应对照品的量X(μg)为横坐标得槲皮素回归方程为：Y=1E+07X－79055，r=0.9999，线性范围0.042～0.84μg；异鼠李素回归方程为Y=7E+06X-49467，r=0.9999，线性范围0.0412～0.824μg。2.5精密度实验对照品混合溶液，重复进样5次，测定峰面积。结果槲皮素峰面积RSD为2.06％，异鼠

7、李素峰面积RSD为2.50％。2.6稳定性实验取同一供试品溶液，间隔一定时间进样，依法测定峰面积。结果异鼠李素峰面积RSD为2.61%（n=5）；槲皮素峰面积RSD为2.20%（n=5）。供试品溶液在8h内稳定。2.7重复性实验取同一批药材5份，按供试品溶液制备方法，分别测定槲皮素、异鼠李素峰面积。结果槲皮素峰面积RSD为2.36%，异鼠李素峰面积RSD为2.95%。2.8加样回收实验精密称取已知含量的样品0.5g，分别精密加入一定量的槲皮素及异鼠李素对照品，按“供试品溶液制备”方法进行测定并计算回收率，结果槲皮素平均回收率为

8、98.98％，RSD为1.56%(n=6)，异鼠李素平均回收率为99.27％，RSD为0.86%(n=6)。2.9样品测定取不同批次的沙枣药材粉末，按“2.3”项下方法处理，进样测定。结果见表1。表1沙枣中槲皮素和异鼠李素测定（略）3讨论我们针对异鼠李素、槲皮素进行紫外光谱扫