高效液相色谱法测定槐米中槲皮素的含量-论文.pdf

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1、94·实验研究·June2014，Vo1．12，No．18高效液相色谱法测定槐米中槲皮素的含量赵虎平(包头医学院第一附属医院药剂科，内蒙古包头014010)【摘要l目的建立槐米中槲皮素的含量测定方法。方法利用甲醇一O．4％磷酸溶液(60：40，v／v)检测波长375rim，其中甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯，流速为0．8mL／min。色谱柱：Diamonsil(TM)C18(416mi／1×250mm，5m)。结果槲皮素在1．964～19．64mg／mL的浓度范围内峰面积和浓度呈良好的线性关系r=0．9994；测得回收率为98．

2、6％，RSD为1．8％。结论方法准确可靠、简便，适用于槐米中槲皮素的含量测定。【关键词】槐米；槲皮素；高效液相色谱法；含量测定中图分类号：R446；R9文献标识码：B文章编号：1671—8194(2014)18—0094—02槐米是豆科植物槐(SophorajaponieaL)的干燥花蕾或花，具有2．5精密度试验清肝泻火的功能川。其主要成分为黄酮类，与槐花的药理作用密切相取对照品溶液1mL于10mL量瓶中，用甲醇(色谱纯)稀释至关。因此，槐花的质量主要由黄酮类的含量决定。黄酮类中的黄酮苷刻度，超声处理后20L进样，重复5次，

3、记录峰面积，计算主峰面主要包括芦丁及槲皮素等。槲皮素(Quercetin)是黄酮醇的一种代表积的相对标准偏差，其中五次的值分别为134076．031，133516．383，性化合物，具有很高的药用价值，能够抗氧化、清除氧自由基、降低129512．398，137479．516，143425．297，RSD为0．69％。血压、保护心肌缺血再灌注损伤等】。可据此利用槲皮素制作中药制2．6重现性试验剂，并进行提取。本研究采用加热回流法，对槲皮素进行提取，并建取样品粉末0．12g，进行精密称定后，按上述制备方法和测定立针对其的HPLC

4、~定方法。条件，重复测定5份。记录峰面积分别为35141．293，32630．783，1仪器与试剂34890．906，32856．066，36646．836，RSD为0．26％。1．1仪器2．7回收率试验高效液相色谱仪(日本岛滓，LC—lOTvp)；紫外一可见检测器(SPD一取样品粉末0．12g，进行精密称定后，按上述供试品溶液的制10Avp)t双通道色谱工作站N一2000(浙江大学智能信息工程研究所，备方法和测定条件，重复测定6份测定结果如表1。测得回收率为浙江大学智能信息工程有限公司)，BSll0S电子天平(北京塞多利斯

5、天98．6％，RSD为1．8％。平有限公司Max为110g，d=0．1mg)；KQ一50型超声波清洗器(昆山市表1回收率试验结果超声仪器有限公司)；0．45pm微孑L滤膜；水浴回流装置；容量瓶等。1．2试剂槐米，槲皮素标准品；甲醇(色谱纯)，甲醇(分析纯)，水为重蒸馏水；磷酸为分析纯，25％盐酸。2方法2．I色谱条件色谱柱：Diamonsil(TM)C18(416mmx250mm，5m)；流动相：甲醇一0．4％磷酸溶液(60：40，v／v){检测波长：375111"1"1；流速：0．8mL／min。3结果与讨论2．2对照品溶

6、液的制备3．1结果精密称取槲皮素对照品0．001g，于100mL量瓶中加适量甲醇溶取适量槐米，研磨，过100目筛，约0．12mg粉末，精密称定后解、定容配成1Oug／mE的溶液100mL，备用。加甲醇一25％盐酸(4：1)混合溶液25mL，水浴回流30rain以使其冷2．3供试品溶液的制备却，置5OmL量瓶中精密吸取1mL置25mL量瓶中，加甲醇，超声处取槐米适量，用研钵研磨，过100目筛得本品粉末。取本品粉末理20rain使完全溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取2OL，0．12g，加甲醇一25％盐酸(4：1)混合溶液水

7、浴回流30rain，放冷，注入液相色谱仪，记录色谱图，测得4批(n=3)样品中槲皮素的含置于50mL的量瓶中，加甲醇使其稀释至刻度，摇匀即可。量分别为：12．46％(RSD=0．75％)；9．78％(RSD=I．0％)；9．43％2．4标准曲线的制作(RSD=0．64％)；11．09％(RSD=O．38％)。取槲皮素对照品5mL置50mL量瓶中，加甲醇(色谱纯)，超声3．2讨论处理20rain后过滤，加甲醇(色谱纯)定容到刻度，备用。精密量3．2．1检测波长的选择取上述对照品溶液0．20，O．25、1．2O、2．00mL，分

8、别置4个10mL量瓶取适量的槲皮素对照品，以甲醇为溶剂，在紫外可见分光光度计中，加甲醇(色谱纯)稀释至刻度，摇匀。分别量取20注入色谱上，于200-600nm扫描。结果显示，槲皮素在264nnl375nm波长处，仪，记录色谱图。以浓度(C∥mL)为横坐标、峰面积为纵坐标进吸收量最大。在同一