高效液相色谱法测定山楂叶中槲皮素的含量论文

《高效液相色谱法测定山楂叶中槲皮素的含量论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、高效液相色谱法测定山楂叶中槲皮素的含量论文权迎春关丽萍郑光浩【关键词】高效液相色谱法摘要：目的建立山楂叶中高效液相色谱(HPLC)法的含量测定方法。方法采用HPLC对槲皮素进行定量测定；采用YMCpackODSA(4.6mm×250mm,5μm)，色谱柱，检测波长为370nm。结果色谱条件为流动相甲醇0.2%磷酸溶液(50∶50)；柱温25℃；流速0.8mlmin1，此法线性范围0.08～0.32μg，r=0.9992，方法的精密度RSD为1.04%(n=5)。平均回收率为96.75%，RSD=1.67%(n=5)。结论此方法操作简便、准确性好，可以

2、作为山楂叶中槲皮素含量测定方法。关键词：山楂叶；高效液相色谱法；槲皮素；含量测定Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofquercetininhainedbyHPLC.YMCODSA(4.6mm×250mm,5μm)column.ResultsThemobilephaseconsistedofmethanol0.2%phosphaticacid(50∶50)lmin1andcolumntemperatureat25℃.ThemethodethodRSDethodapp

3、earedtobesimple,highlyaccurate.Itcanbeusedfortheappeareddeterminationofquercetininhaination山楂叶为蔷薇科植物山里红CrataeguspinnatifidaBge.Var.majorN.E.Br.或山楂CrataeguspinnatifidaBge的干燥的叶.freelm×250mm,5μm)色谱柱；流动相为甲醇0.2%磷酸溶液(50∶50)；柱温：25℃；流速：0.8mlmin1。2.2测定波长的选择取槲皮素对照品配制成一定浓度的甲醇溶液，在200～500nm

4、波长范围内进行紫外光谱扫描，确定370nm做为测定波长。2.3标准曲线绘制2.3.1标准溶液的配制精密称取槲皮素对照品8.9mg，置于50ml量瓶中，加入甲醇溶解，定容于50ml，然后精密吸取1ml置于10ml容量瓶中定容，备用。2.3.2线性范围取上述槲皮素对照品溶液，分别进样5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5μl，按色谱条件测定峰面积积分值，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准吸收曲线，得槲皮素(C)与峰面积(A)的关系，C=599370－1.628245A，相关系数r=0.9992。结果表明，槲皮素溶液浓度在0.08～0

5、.32μg内，槲皮素峰面积(A)与浓度(C)之间呈良好的线性关系。HPLC色谱图见图1。图1HPLC色谱图2.4精密度实验精密吸取对照品供试液，按“2.1”项下条件，连续进样5次，10μl/次，测定峰面积积分值计算RSD值，结果RSD=1.04%，说明仪器和色谱条件均具有良好的精密度。2.5重现性实验精密称取药品粉末0.5g共5份，按“2.8”项下样品溶液的制备操作，按“2.1”项下条件连续进样5次，每次20μl，测定峰面积计算得RSD=1.35%，结果显示，该方法具有较好的重现性。2.6稳定性实验在室温条件下，将样品按测定方法处理后，分别在0，0.

6、5，1.0，1.5，2.0h每次进样20μl，测得峰面积计算RSD=0.84%（n=5）。结果表明，该溶液含量基本保持不变。2.7回收率实验精密称取样品0.5g共10份，其中5份按2.8项下测定样品本底含量，5份各加入槲皮素对照品溶液适量，溶解。按2.8项下采用高效液相色谱法测定槲皮素含量，计算回收率为96.75%，RSD为1.67%(n=5)。2.8山楂叶提取物中槲皮素含量的测定称取干燥并切成细段的山楂叶50g，用8倍量75%乙醇浸泡过夜，80℃水浴里回流3h，提取两次，合并滤液，用旋转蒸发器减压浓缩，获山楂叶乙醇提取物粗粉，精密称取提取物100m

7、g，加入少量甲醇溶解，移入50ml量瓶中，定容，摇匀，用微孔滤膜过滤，作为供试液，精密移取供试液20μl，注入高效液相色谱仪，在370nm处测定峰面积，根据线性回归方程，计算含量见表1。表1山楂叶中槲皮素含量测定的结果序号（略）3讨论本实验利用高效液相法测定山楂叶中槲皮素的含量尚属首次，该方法简便、准确，重现性好，为山楂叶药物的开发提供了质量控制标准。