高效液相色谱法测定岗松中槲皮素的含量论文

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1、高效液相色谱法测定岗松中槲皮素的含量论文【摘要】目的对岗松进行分析研究，测定岗松中槲皮素含量,为岗松的质量标准制定提供方法和依据。方法采用高效液相色谱法（HPLC）测定岗松中槲皮素含量。色谱柱为LichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm)，流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺（50:50:0.45:0.2），检测波长370nm，柱温室温，流速1ml/min。结果槲皮素在0.08～0.48μg范围内呈良好线性关系（r=0.9994），平均回收率为100.64％，RSD为1.65％(n=9)。结论该法简便可行.freelethodfordet

2、erminingthecontentofquercetininthenaturalherbofBaeckeafrutescensL..MethodsAnHPLCmethodinethecontentofquercetininBaeckeafrutescensL.,usinglichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm)column，andmethanol-ine(50:50:0.45:0.2)asthemobilephase,theUVdetection,l/minatroomtemperature.ResultsAgoodlinea

3、rethodissimple,andinationofquercetininBaeckeafrutescensL.Keym×250mm,5μm)；流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺（50∶50∶0.45∶0.2）；检测波长370nm；柱温室温；进样量20μl；理论塔板数按槲皮素计算大于3500。2.2提取条件的选择对回流时间进行了比较，结果加热回流1h的提取率显著高于0.5h，而与回流2h的提取率相当（见图1），表明回流1h基本可以将样品中的槲皮素提取完全，为缩短分析时间，选择回流时间为1h。图1不同提取时间提取率的比较（略）2.3对照品溶液及供试品溶液

4、的制备2.3.1对照品溶液的制备精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇制成12.5μg/ml的对照品溶液，色谱图见图2。图2槲皮素对照品色谱图（略）2.3.2供试品溶液的制备取岗松药材粉末0.3g，精密称定，置烧瓶中，精密加入50%甲醇-盐酸（95:5）混合溶液25ml，密塞，称定重量，加热回流1h，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（0.45mm）滤过，取续滤液，即得。色谱图见图3。2.4线性关系的考察精密称取槲皮素对照品约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得1mg/ml标准品溶液，精密吸取2.5ml标准品溶液至5

5、0ml量瓶中，用流动相稀释并定容至刻度，得50μg/ml的溶液，摇匀，备用。分别精密吸取50μg/ml的对照品溶液0.8ml，1.6ml，2.4ml，3.2ml，4.0ml，4.8ml至10ml量瓶，加流动相稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件，进行测定。以对照品进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标进行线性回归，得回归方程为Y=8.2491×106X-2.9605×104，r=0.9994。结果表明，对照品在0.08～0.48μg范围呈良好线性关系。图3供试品色谱图（略）2.5精密度实验取同一供试品溶液，连续重复进样6次，结果槲皮素峰面积平均值为1944

6、301，RSD=1.69%。2.6稳定性实验取同一供试品，每隔2h进样，进行了12h考察，结果槲皮素含量的RSD＝1.83%。2.7重复性实验精密称取同一批次岗松药材样品各6份，按上述供试品溶液制备方法和色谱条件测定峰面积并计算，结果槲皮素的平均含量为1.0639mg/g，RSD＝2.30%。2.8加样回收率试验称取已测知含量的药材样品（槲皮素平均含量为1.0639mg/g）0.15g，共9份，精密称定。按高、中、低3个浓度分别精密加入1.0mg/ml的槲皮素对照品溶液0.10，0.16，0.22ml，按上述供试品溶液制备方法和色谱条件测定峰面积并计

7、算，结果槲皮素的加样平均回收率为100.64%,RSD=1.65%。2.9样品含量测定收集不同产地的岗松药材，按上述供试品溶液制备方法和色谱条件依法测定槲皮素含量。结果见表1。表1岗松样品中槲皮素含量测定结果（略）3结论本实验建立了分析岗松药材中槲皮素含量的HPLC法，以前对岗松药材的研究多局限于其中的挥发油成分，通过本次研究，完善了岗松药材的质量标准，为药材的进一步开发利用提供了更多的化学数据。【