高效液相色谱法同时测定沙枣中槲皮素和异鼠李素的含量

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1、高效液相色谱法同时测定沙枣中槲皮素和异鼠李素的含量杜瑞芳,王雨梅刘卫东，马丽【摘要】　　目的建立沙枣中槲皮素（Quercetin）和异鼠李素（Isorhamin）的高效液相色谱测定方法。方法采用ODS柱，甲醇0.1%磷酸溶液（58∶42），检测波长370nm。结果槲皮素在0.042～0.84μg范围内线性关系良好，异鼠李素在0.0412～0.824μg范围内线性关系良好；该法回收率槲皮素为98.98％，异鼠李素为99.27％；RSD槲皮素为1.56％，异鼠李素为0.86％（n=6）结论该方法为沙枣的含量测定提供了一种快速和准确的方法，为蒙药植物资源的进

2、一步开发提供了可靠的依据。【关键词】沙枣槲皮素异鼠李素含量测定高效液相色谱法　　Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfordeterminationofquercetinandisorhamininFructusElaeagni.MethodsTheseparationedonKromasilC18Column(250mm×4.6mm,5μm)andthemobilephaseethanol-0.1%phosphoricacid(58∶42).Quercetinandisorhamin.ResultsThes

3、tandardcurvein,respectively.Therecoveryin,respectively.ConclusionThismethodisrapidandaccuratefordeterminationofquercetinandisorhamin.ItcouldbeusedforfurtherexploitationofMongoliaherbalresources.　　Keyin；Assay；HPLC　　沙枣，为胡颓子科植物沙枣ElaeagnusangustifoliaL.的干燥成熟果实，具有补虚，安神，健脾，止泻等功效，用于治疗身体

4、虚弱，神志不清，消化不良，腹泻〔1〕。在西部地区，沙枣被称为“百树宝”，果实营养丰富，含糖量较高，干品为62%～70%，主要为果糖，蛋白质、维生素C也比较丰富。另外，果实中还含有鞣质、黄酮类和黏液质〔2〕。人们对其枝、叶及花进行研究，发现各部分都含有黄酮类化合物〔3，4〕，果实中所含黄酮类化合物的测定未见报道。本研究首次采用HPLC法测定沙枣果实中槲皮素和异鼠李素含量，操作简便，测定灵敏度、准确度均较好，对更好地开发沙枣药用植物资源具有一定的意义。　　1器材　　1.1仪器　　Agilent1100液相色谱仪，Agilent1100紫外检测器，AS3120

5、超声波清洗机，AG135电子分析天平。　　1.2试药　　槲皮素对照品和异鼠李素对照品均由中国药品生物制品检定所购入；水为双蒸水，甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。　　1.3药材沙枣采自内蒙古巴彦淖尔、乌海，由内蒙古大学生命科学学院赵立清博士鉴定为沙枣ElaeagnusangustifoliaL.的果实。　　2方法和结果　　2.1色谱条件　　KromasilC18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm，100A）；流动相：甲醇0.1％磷酸溶液（58∶42）；检测波长370nm；体积流量：1.0ml/min；柱温：室温；进样量：20μl。在此条件下供试品中

6、槲皮素成分、异鼠李素成分能与其它成分达到较好分离。见图1。　　2.2对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品和异鼠李素对照品适量，加80％甲醇分别制成每毫升含槲皮素和异鼠李素200μg的溶液。精密量取上述对照品溶液各0.5ml，置10ml量瓶中，加80％甲醇制成每毫升含槲皮素和异鼠李素10μg的混合对照品溶液。　　2.3供试品溶液制备取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加80%甲醇50ml，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25ml，置具塞锥形瓶中，加25%盐酸溶液10ml，摇匀，

7、置水浴加热回流30min，立即冷却，转移至50ml量瓶中，用适量80%甲醇洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加80%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。　　2.4标准曲线制备取槲皮素对照品和异鼠李素对照品各约10mg，精密称定，分别置不同的50ml量瓶中，用80％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。各精密量取10.0ml置25ml量瓶中，加80％甲醇至刻度，摇匀，即得对照品混合溶液。精密量取对照品混合溶液0.25，0.5，1.0，2.0，5.0ml置于10ml量瓶中，80％甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样20μl测定峰面积。以对照品峰面积Y为纵坐标，相应对照品的量

8、X(μg)为横坐标得槲皮素回归方程为：Y=1E+07X－79055，r=0.99