高效液相色谱法测定维生素k1冻干乳中药物含量论文

《高效液相色谱法测定维生素k1冻干乳中药物含量论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、高效液相色谱法测定维生素K1冻干乳中药物含量论文【摘要】目的：建立反相高效液相色谱法测定维生素K1冻干乳中药物含量。方法：冻干乳重建后用异丙醇破乳。采用HypersilBDSC18柱（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇∶无水乙醇（70∶30）为流动相，检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，进样量20μL，柱温35℃。结果：制剂中辅料对主药测定无干扰，维生素K1在25～250mg/L范围内峰面积与浓度线性关系良好.freelinethecontentofVitaminK1inlyophilizedemulsionbyreversedphasehighperformancel

2、iquidchromatography.Methods:ThereconstitutedVitaminK1emulsionixedn(4.6mm×250mm,5μm)obilephaseethanoldehydratedalcohol(70∶30),theUVdetectoratandthefloL/min.Theinjectionvolumentemperature35℃.Results:TheexcipientsdidnotinterfereinationofVitaminK1.Themethodprovedtobelinearg/L.Therecoveryoftheassayuls

3、ionbreaking,meanpactonmeasurementofVitaminK1.Themethodappearstobesimple,speedy,accurateandcanbeusedtocontrolthepreparationquality.［KeyinK1;Lyophilizedemulsion;Determination维生素K1为人体肝内合成凝血酶原的必需物质，可促进凝血酶原（Ⅱ因子）及其它凝血因子（Ⅷ因子、Ⅸ因子和Ⅹ因子）的前体物质羧化后转变成凝血酶原及相应因子［1］。临床常用于治疗肝硬化引起的消化道出血及新生儿与产妇维生素K1缺乏。但由于维生素K1在水中不溶，其

4、溶液型注射剂含有增溶剂吐温80，该增溶剂易氧化，其氧化产物易引起过敏，用量较大时具有一定溶血作用［2，3］。将维生素K1制成冻干乳，临用前加水重建成亚纳米乳可避免现有注射液的安全性、水溶性和稳定性问题。冻干乳剂含乳化剂、冻干保护剂等成分，其含量测定则需要排除这些成分的干扰。本文建立了一种准确、简便的冻干乳中维生素K1的含量测定方法，现报道如下。1仪器与试药LC2010A型高效液相色谱仪，配备UV/Vis检测器、LCsolution色谱工作站（日本岛津）；电子天平（Sartorius）；KLupII10型超纯水机（台湾艾柯）。维生素K1冻干乳（规格：10mg，自制）；维生素K1对

5、照品（中国药品生物制品检定所，100156200003）；甲醇、无水乙醇为色谱纯；其它试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：大连依利特HypersilBDSC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇∶无水乙醇（70∶30）；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；检测波长：254nm，进样量：20μL。2.2储备溶液和对照品溶液的配制精密称取维生素K1对照品适量，加异丙醇制成每毫升中含维生素K11000μg的溶液，摇匀，过滤，取续滤液作为储备液。将储备液以异丙醇稀释10倍作为对照品溶液（100mg/L）。2.3供试品溶液的制备精密量取维生素K1冻干乳适量（相当于维

6、生素K110mg），加水重建成乳状液，置于100mL容量瓶中，加异丙醇破乳并稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。2.4系统适应性试验在上述色谱条件下，取对照品溶液（100mg/L）及供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。维生素K1的保留时间为8.7min，与相邻成分能完全分离（R1.5）。以药物峰计算色谱柱的理论塔板数为7259。按处方比例及工艺条件制备不含维生素K1的阴性空白冻干乳，按“2.3”项下供试品溶液的制备方法处理样品，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果表明，处方中辅料不干扰测定。色谱图见图1。2.5标准曲线的制备精密量取储备液适量，加异丙醇稀释制成25、50、100、

7、150、200、250mg/L的系列浓度溶液；分别精密吸取20μL进样，记录峰面积；以药物浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），得回归方程：Y=3.81×104X-2.74×104，r2=0.9998，维生素K1在25～250mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系，可采用外标一点法测定药物含量。2.6定量限与检测限取对照品溶液逐级稀释成适当浓度，吸取20μL进样，使其主药峰高为噪音峰高的3倍，对应浓度作为其最低检出浓