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《高效液相色谱法(HPLC) 测定牛乳中β-乳球蛋白》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、高效液相色谱法(HPLC)测定牛乳中α-乳白蛋白Determinationofα-lactalbumininmilkproductsbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC)11112关荣发，黄光荣，贾振宝，戴贤君，叶兴乾11112GUANRong-fa,HUANGGuang-rongn,JIAZhen-bao,DAIXian-jun,YEXing-qian（1.中国计量学院生命科学学院，杭州310018;2.浙江大学食品科学与营养系，杭州310029）
2、(1.CollegeofLifeSciences,ChinaJiliangUniversity，HangZhou310018;2.DepartmentofFoodScienceandNutrition,ZhejiangUniversity,Hangzhou310029)摘要:建立了利用常规的C18色谱柱的高效液相色谱测定牛乳中主要过敏蛋白α-乳白蛋白含量的方法。色谱条件:色谱柱Alltima-C18(4.6mm×200mm,5μm),柱温为45℃,UV检测波长2l5nm,流动相A为含0.1%三氟乙
3、酸的超纯水,流动相B为乙腈∶超纯水∶三氟乙酸=400∶100∶0.5，采用梯度洗脱方法，流速0.8mL/min。结果表明:α-乳白蛋白的线性范围分别为50μg/mL-1000μg/mL(r=0.9909);α-乳白蛋白平均回收率为97.27%,RSD=0.76%(n=5);该方法简便、准确,适合于乳制品中α-乳白蛋白含量的测定。关键词:高效液相色谱法;α-乳白蛋白;乳制品;测定Abstract:Amethodforthedeterminationofα-lactalbumininmilkprodu
4、ctsbyhighperformanceliquidchromatographyhasbeenestablished.Thechromatographyconditionsasfollow:Alltima-C18conlum(4.6mm×200mm,5μm),UVdetectionwavelengts215nm.Thismethodconsistedofalineargradientofthetwomobilephasesof0.1%trifluoroaceticacidinwaterand0.5
5、%trifluoroaceticacidand80%acetonitrileinwaterataflowrateof0.5mL/min,Theconlumtemperaturewas25℃.Theresultshowedthatforα-lactalbuminthecalibrationcurvewaslinearintherangeof50μg/mL~1000μg/mL(r=0.9909).Theaveragerecoverypercentwas97.27,theRSDwas0.76%(n=5)
6、.Themethodsissuitableforcontentsanalysisofα-lactalbumininmilkproducts.Keywords:highperformanceliquidchromatography;α-lactalbumin;milkproducts;determination随着人们生活水平的提高，奶制品在国内的消费量迅速增加，2005年我国城镇居民奶类人均消费量（折鲜奶）已达25公斤以上，饮用UHT奶、巴氏杀菌奶等液态奶已在我国渐成习惯，液态乳已经成为我国的主要
7、乳制品。但牛乳过敏是儿童中一种常见的食物过敏，严重地影基金项目：浙江省分析测试科技计划项目（编号：2007F70027）作者简介:王关荣发(1975-)男,中国计量学院生物安全与食品科学研究所讲师,博士研究生。E-mail:rfguan@163.com[]1[]2响儿童的身体健康。在成年人中牛乳过敏也时有发生，已引起了全球的广泛关注。牛乳中的主要过敏成分有α-乳白蛋白、酪蛋白和β-乳球蛋白等。2002年国际食品规范委员会提议对欧[]3洲的食品标签法规进行修改，提议对所有的食物中的过敏成分进行标识。
8、这一提议对保护食物过敏人群非常有利，但同时也要求更可靠有效的食物过敏原检测方法来确保它的实施。用于检测牛乳过敏原的方法主要有：免疫吸附实验、SDS-PAGE电泳、酶联免疫吸附实验、聚丙烯凝胶电泳结合激光扫描、电泳和毛细管电泳等方法。但以上各种方法在测定α-乳白蛋白时都有一定的难度，难以在实践中应用。反相高效液相色谱法是分析乳清蛋白成分的有效方法之一，与其他色谱方法相比具有分辨率和回收率高、重复性好、操作简便等优势,国内外相关的α-乳白蛋白液相测定方法需要专门的C4色谱柱，而C4色谱
