高效液相色谱法测定辣椒中维生素C的含量

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1、2008年11月南京晓庄学院学报Nov.2008第6期JOURNALOFNANJINGXIAOZHUANGUNIVERSITYNo.6高效液相色谱法测定辣椒中维生素C的含量1211胡应杰,潘康标,陈昌云,柳闽生(1.南京晓庄学院化学系,江苏南京210017;2.江苏省农产品质量检验测试中心,江苏南京210036)摘要:文章建立了一种高效液相色谱测定辣椒中维生素C含量的方法.采用0.1%的草酸作为提取剂,色谱中采用Hypersil2C18色谱柱,pH=6,0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液:甲醇=95∶5(v/v)作流动相.流速1.0ml/min,

2、DAD检测器,检测波长254nm.维生素C在20—100mg/L内有良好的线性关系,线性回归方程为y=29.664x-12.37,相关系数为0.9953,方法回收率为91.24%-105.6%,相对标准偏差小于2%.本文测定方法简便,快速,能准确测定辣椒中维生素C的含量.关键词:辣椒;高效液相色谱;维生素C中图分类号:O642文献标识码:A文章编号:100927902(2008)06200302030引言1实验部分辣椒营养价值很高,堪称“蔬菜之冠”,其富含1.1仪器与试剂维生素B、维生素C、蛋白质、胡萝卜素、铁、磷、钙,HP1100高效液相色谱仪配

3、有二极管阵列检测以及糖等成分,尤其是维生素C的含量特别丰富,器(美国惠普公司);色谱柱Hypersil2C18(5μm,150居蔬菜中的前列.每百克辣椒中所含维生素C比茄mm×416mm)(中国科学院兰州化学物理研究所);子多35倍,比西红柿多9倍,比大白菜多3倍.KQ5200B型超声波清洗器;AE系列电子天平(梅特维生素C又名抗坏血酸,是一类水溶性的活性物勒2托利多仪器上海有限公司);组织捣碎机,布氏漏质,有较强的还原作用,及重要的生理功能.维生素C斗,烧杯,25ml棕色容量瓶.维生素C标准对照品[122]它广泛存在于新鲜的水果、蔬菜中,人体本身

4、不能(维生素C含量99.17%,中国医药集团化学试剂公合成,必须依靠膳食供给,因此研究水果蔬菜中维生司);2次蒸馏水;甲醇(色谱纯,美国Fisher公司);素C的含量测定方法具有重要意义.维生素C测定草酸、盐酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾均为分析纯;市的方法一般有化学法、比色法、紫外分光光度法、荧光售青椒、虎皮尖椒、甜椒、杭椒、小红尖椒.[324]法等,这些方法所需试剂较多、操作繁琐.高效液1.2样品处理及实验条件[5][9]相色谱法具有高效、快速、稳定、可靠等特点.在所样品处理采用国标的方法:将辣椒洗净,切开,放测样品较多的情况下,借助仪器的分析方法

5、能更快更置于匀浆机中,加0.1%的草酸为提取剂,匀浆,然后用布准确的进1行含量的测定,且准确性较高.近年来用氏漏斗过滤.称取5g样品滤液于50mL容量瓶中,用高效液相色谱法测定维生素C含量已有一些报011%草酸溶液定容,分析前用0145μm滤膜过滤.[628]道,但用此方法测定几种辣椒中的维生素C含量高效液相色谱的条件:A:pH=6,0.05mol/L磷尚未见报道.本文选择五种常见辣椒,通过液相色谱酸二氢钾,B:甲醇(A:B=95∶5v/v)为流动相,流速分离条件优化,建立了一种简便、快速、稳定的辣椒中为1.0ml/min,检测波长254nm,进样

6、量10μl,柱温各种维生素C含量测定方法.该方法同样适合于其它20℃维生素C标准溶液的制备:准确称取维生素C水果和蔬菜中维生素C的含量测定.标准品50mg于小烧杯中,用0.1%的草酸溶解,搅收稿日期:2008206201修改日期:2008209201基金项目:南京晓庄学院院级科研项目(2006NXY18)作者简介:胡应杰,男,南京晓庄学院化学系教师,硕士.—30—-1拌,转移至50ml棕色容量瓶中,加水定容,得到维100mg·L维生素C标准溶液,定容至50ml,溶液生素C含量为1000μg/ml的标准溶液.用0.45μm滤膜过滤,用微量进样器进样1

7、0μL,依次测出峰面积.然后以维生素C标准溶液质量浓度2结果与讨论(mg/L)作自变量,相对应的峰面积作因变量,绘制2.1维生素C提取剂的选择标准工作曲线,如图1所示.标准曲线的相关系数2维生素C溶液热稳定性较差,在中性或碱性水R=0.9953,说明曲线的线性关系良好.溶液中易被氧化,但在酸性溶液中却很稳定.提取维[3,9,10]生素C的方法很多,为防止样品及标样中维[8]生素C被氧化分解,用0.1%草酸溶液作溶剂来溶解样品及标样.2.2流动相的选择考虑到维生素C在酸性环境中比较稳定,选择调节流动相的pH值为酸性.经过采用不同值的实验证明,pH值在

8、5.0～6.5之间,维生素C的吸收比较大,灵敏度比较高,因此本文选择磷酸二氢钾为流动相,调节pH值为6.0[11].本文选