反相高效液相色谱法同时测定儿童血清中维生素a、e含量的研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com110安徽预防医学杂志20o8年3月20日第14卷第3期AnhuiJPrevMed。Mar．20。20o8。V0l14，No．2·论著·反相高效液相色谱法同时测定儿童血清中维生素A、E含量的研究郑妹凤，李勇竞，谷素冰【摘要】目的建立反相高效液相色谱法同时测定儿童血清中维生素A和维生素E的方法。方法取儿童血清50，加入500p,L无醛乙醇，振荡，加入正己烷萃取，将正己烷用氮气吹干后用流动相溶解。色谱条件：ZobaxsB—c。82．1×150mm(5皿)；流动相：甲醇：水(96：4)，检测波长：维生素A325nm；维生素E294

2、nm。结果维生素A在50—500L浓度范围内呈线性，r=0．9996，维生素E在0．5一lOixg／L浓度范围内呈线性关系，r=0．9997；维生素A和维生素E的平均回收率分别为98．18％(RSD=3．21％)和98．12％(RSD=3．41％)。结论本方法检测儿童血清中维生素A和E的浓度，方法快速、准确，样品处理简便，需要的血清量少。【关键词】维生素A；维生素E；反相高效液相色谱；血清【中图分类号】R657．8【文献标识码】A【文章编号】1007—1040(2008)02—0110—03SimultaneousDeterminationofRetinaland—Toc

3、opherolinChildrenSerumbyRP—ILCZHENGMei一ng，ng一西，GUSu—bin(地CentreforDiseaseControlandPrevention，“Anhui，241000，China)【Abstract】ObjectiveToestablishamethodtosimultaneouslydeterminatetheconcentrationofretinaland—to．copherolinchildrenserum．Methods50O3serumwasadded500anhydrousethanoland1000hexan

4、e。themixturewasvotaxedandcentrifuged，thenthehexaneWasdriedbyN2gas，thevitaminthenresolvedwithmobilephase．TheHPLCsystemWasconsistedofZobaxSB—C182．1×150mm(5m)，mobilephaseWasmethanol：water(96+4)，detec—tedwavelengthWas325nmforretino1．294nmfor—toeophero1．ResultsThelinearrangeofdeterminationofre

5、tinoland—tocopherulwere50—5001．~g／L(r=0．9996)and0．5—10L(r=0．9997)respectively．Thepikedrecoverieswere98．18％(RSD=3．21％)forretinoland98．12％RSD=3．41％)fora—toeophero1．ConclusioI15ThemethodWasrapid，accurate，simplyoperatingandneededalittleofserum．【Keywords】Retinol；—Tocopherol；RP—HPLC；Serum维生素A和维

6、生素E是机体维持正常代谢和机清中维生素A、E含量的反相高效液相色谱法。能必需的脂溶性维生素⋯。近年来的研究发现，维1材料与方法生素A和维生素E与儿童的生长发育及一些营养代谢疾病有密切关系。婴幼儿时期维生素A容易缺1．1原理样品经溶剂提取、氮气吹干净化后，用反乏。维生素A亚临床缺乏(SVAD)时无任何临床表相高效液相色谱一紫外可见光检测器进行色谱分析，现，但可使机体抵抗力降低，导致疾病易于发生。我采用内标法定量。国儿童亚临床维生素A缺乏现象较普遍，VA营养不1．2仪器与试剂HP1100高效液相色谱仪带紫外良是我国亟待解决的儿童健康问题之一。婴儿特别检测器。37~C温箱。普通

7、离心机。紫外分光光度计。是新生儿往往缺乏维生素E，结果会导致贫血、浮肿氮吹仪。甲醇(色谱纯)。无醛乙醇、正己烷(均为分及皮肤散在红色斑丘的症状，影响儿童健康J。析纯)。视黄醇、一生育酚、视黄醇醋酸酯标准品，因此，建立测定儿童血清中维生素A和维生素E含量>99％，均购自Sigma公司。的分析方法，具有对预防儿童营养缺乏及相关疾病的1．3色谱条件HPLC色谱条件：ZobaxSB—CI82．1发生具有一定的现实意义。本文在查阅了大量文献×150mm(5m)；流动相：甲醇：水=96：4；柱温：的基础上，建立了一种快速、准确的同时测定儿