反相高效液相色谱法测定茄根中绿原酸含量

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1、反相高效液相色谱法测定茄根中绿原酸含量【摘要】目的建立茄根中绿原酸含量的反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定法。方法色谱柱为YMC-PackODS-AA（150mm×4.6mm,5μm），以乙腈-甲酸水的梯度流动相洗脱，检测波长323nm，流速1ml·min-1,柱温30℃。结果在线性范围内(0.005～0.04mg·ml-1)绿原酸对照品的标准曲线呈良好的线性关系(r=0.9998),茄根中绿原酸的含量为0.108mg·g-1，RSD为2.4%；平均回收率为98.51%，RSD为2.7%。结论可通过RP-HPLC测定茄根中绿原酸含量,为茄根的进一步开发利用提供科学依据

2、。【关键词】白茄根；绿原酸；反相高效液相色谱　　Abstract：ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofchlorogenicacidcontentinthedriedrootofSolamummelongenaL..MethodsChromatographicconditionincludedaYMC-PackODS-AA（150mm×4.6mm,5μm）,agradientsolventsystemofacetonitrileandwaterwasappliedfrom10%to60%ofacetonitrilewi

3、thin30minuteswiththedetectionwavelengthat323nm.Theflowratewas1.00ml·min-1andcolumntemperaturewassetat30℃.ResultsThelinearrelationshipofchlorogenicacidwasdeterminedwithintherangefrom0.005to0.04mg·ml-1(r=0.9998).Usingthemethodabove,thecontent7ofthechlorogenicacidwasdeterminedas0.108mg·g-1，R

4、SDwas2.4%,withtherecoveriesas98.51%withRSDwas2.7%.ConclusionAconvenientandreliablemethodwasestablishedtodeterminethecontentofchlorogenicacidinthedriedrootofSolamummelongenaL..　　Keywords：SolamummelongenaL.;Chlorogenicacid;RP-HPLC　　茄根为土家族常用药物之一，来源于茄科茄SolamummelongenaL.的干燥根，具有祛风利湿、清热止血、散瘀消肿等

5、功效。主治牙痛、风湿热痹、冻疮、脚气、血痢、便血等。茄根含有酚类、有机酸、生物碱、皂苷、鞣质等多种成分。实验表明酸性组分是茄根抗炎的主要有效部位,对多种炎症具有很好的治疗效果［1］。目前有关茄根酸性成分的研究目前报道甚少。茄是我国主要蔬菜品种之一，全国各地广为种植。茄收获之后产出大量茄根。本文探索建立了采用RP-HPLC测定茄根中酸性成分——绿原酸的定量分析方法。该方法简便快速，待测组分分离度好，精密度及准确度高，稳定性好，可为茄根的深入开发利用以及质量标准的制订提供研究基础。　　1仪器与试药7Varian210分析型高效液相色谱系统（210型二元梯度泵、210型紫外检测

6、器，美国Varian公司）；ME215S型十万分之一电子天平（德国Sartorius公司）；SZ-93自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)；KQ-500DB型超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）；乙腈为色谱纯（fisher公司），水为二次蒸馏水（自制）。茄根：采自中国湖北长阳；对照品：绿原酸，购自Sigma公司，纯度≥98%。　　2方法与结果　　2.1色谱条件YMC-PackODS-AA（150mm×4.6mm,5μm）色谱柱；柱温30℃；流速1ml·min-1；检测波长323nm；进样量20μl；流动相为乙腈（B）-0.5%甲酸水(A)梯度流动相，见表1。在优化的色

7、谱条件下，对照品与供试品的保留时间一致（14.7min），供试品中绿原酸成分达到有效分离,分离度大于1.5。对照品以及供试品的色谱图见图1。表1流动相（略）　　2.2对照品溶液制备精密称取绿原酸对照品适量，加重蒸馏水制成每毫升含1mg的绿原酸溶液，作为对照品溶液贮备液，低温保藏备用。　　2.3供试品溶液的制备称取茄根粉末（60目筛，50℃烘干）约2g，置10ml容量瓶中，加入70%甲醇至刻度，室温下浸渍87h，40℃超声2h,用70%甲醇补足溶剂至刻度。过滤，制成每毫升含0.2g的茄根溶液，作为供试品溶液，低温保藏备用。临用时