高效液相色谱法测定健脑补肾丸中绿原酸含量论文

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1、高效液相色谱法测定健脑补肾丸中绿原酸含量论文靳维荣，高国敬，藤建北【关键词】高效液相色谱摘要：目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定绿原酸含量的方法，控制健脑补肾丸的质量。方法采用HPLC法，色谱柱：ProdigyODS3C18(250nm×4.6nm，5μm)，流动相：乙腈0.4%磷酸溶液（13∶87），检测波长：327nm。结果绿原酸在202.4~708.4μg间有良好的线性关系（r=0.9989）.freelinationofChlorogenicAcidinJiannaoBushenPillsbyHPLCAbstract：Objec

2、tiveTheHPLCmethod×4.6nm，5μm);columntemperature:23℃;mobilephase:amixtureofacetonitrileland0.1%phosphoricacid(13∶87);flolmin1;detection;aliquotinjectedintotheHPLCsystem:10μl.ResultsThelinearrangeofthechlorogenicacidethodple，rapid，sensitiveandaccuratefordeterminationofchlorog

3、enicacidinJiannaoBushenetime,.freelethodcanbeusedtocontrolthequalityofJiannaoBushenl，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.2对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品10.12mg，置250ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。2.3色谱条件色谱柱ProdigyODS3C18(250nm×4.6nm，5μm)，柱温23℃；流动相为乙腈0

4、.4%磷酸溶液（13∶87）；流速1.0mlmin1；检测波长327nm；进样量为10μl。3结果3.1标准曲线的制备精密吸取绿原酸对照品溶液（40.48μgml1）5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5μl，注入高效液相色谱仪，测定其峰面积，结果见图1~3。其回归方程为：Y=-21349.78+3215.17X，r=0.9989。图1绿原酸对照品图谱图2健脑补肾丸样品图谱图3健脑补肾丸阴性对照（缺金银花）图谱表1绿原酸线性范围进样量(略)3.2稳定性实验精密吸取绿原酸对照品溶液（40.48μgml1）10μl，注入液相色谱

5、仪中，每隔30min测定1次，RSD=0.83%。结果见表2。表2稳定性实验时间（路）3.3精密度实验精密吸取绿原酸对照品溶液（40.48μgml1）10μl，连续进样5次，按上述相同条件测定，峰面积积分值为：127109.5,1298972.2，1289625.4，1300659.1，1279207.3，RSD=0.87%。3.4重复性实验按上述相同条件对同一批健脑补肾丸（山东华威药业有限公司，20040813）样品测定5次，结果绿原酸含量（mg/g）分别为1.35，1.39，1.33，1.36，1.35，RSD=1.62%。3.5加样回

6、收率实验取本品粉末约2g，精密称定，加入一定量的绿原酸对照品，按“2.1”项下方法提取，制备供试品溶液，按上述条件进行测定。结果见表3。表3加样回收率实验样品（略）3.6样品测定取3批健脑补肾丸（山东华威药业有限公司20040813，20040316，20041030），按上述条件测定，结果见表5。故可暂定本品每克含金银花以绿原酸（chlorogenicacid）计，不得少于1.30mg。表5样品测定结果批（略）4讨论健脑补肾丸是由人参、金银花等12余味中药组成，组方复杂，质量难以控制，通过测定其组方中的金银花中绿原酸含量，可进一步完善其质

7、量标准，有利于加强质量控制。