高效液相色谱法测定跌打活络微乳中蛇床子素的含量论文

《高效液相色谱法测定跌打活络微乳中蛇床子素的含量论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、高效液相色谱法测定跌打活络微乳中蛇床子素的含量论文王利胜占建坤周莉玲【关键词】高效液相色谱摘要：目的建立跌打活络微乳中蛇床子素含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱：Diamonsil钻石C18（5μm，250mm×4.6mm）；流动相：甲醇水（80∶20），检测波长：322nm；流速：1ml/min。结果蛇床子素在0.042~0.336μg线性关系良好，r=0.9997，平均回收率为100.91%，RSD为2.42%(n=6)。结论该法操作简便，结果准确.freelinationofOstholeinDiedaHuoluoMicroemulsionsb

2、yHPLCAbstract：ObjectiveToestablishthedeterminationmethodforostholeinDiedaHuoluoMicroemulsions.MethodsHPLConsilC18column(250mm×4.6mm,5μm),detection,mobilephase:methanol-l/min.ResultsOstholehasgoodlinearrelationshipbetethodissimple,sensitiveandreliabletocarryouttocontrolthequalityofthi

3、spreparation.Keyulsions;HPLC;Osthole跌打活络膏是由蛇床子、红花、大黄等几味中药材制成，具有活血化瘀、消肿止痛、收敛生肌、舒筋活络的功效，临床用于治疗跌打损伤、水火伤烫伤、扭伤、挫伤、瘀血疼痛等疗效显著。为了提高疗效，便于患者使用，根据各药材的性质、原制法及作用特点，采用超临界萃取技术提取药材中的有效部位，与处方中的挥发油组成油相，并制成O/(十万分之一)天平（日本岛津所）；Aquapro实验室级台式超纯化水机（重庆颐洋企业发展公司）。甲醇（色谱纯）；水（超纯水，临用前制备）；蛇床子素（中国药品生物制品检定所提供，含量测定用，批

4、号：0822200204，纯度检查为99.7%)；其它试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件与系统适应性实验色谱柱：Diamonsil钻石C185μm，250mm×4.6mm色谱柱；柱温：25℃；流动相：甲醇水(80∶20)；检测波长：322nm［2］；流速：1ml/min；进样量：10μl。在选定色谱条件下，测得蛇床子素对照品的保留时间约10.3min；供试品色谱中蛇床子素峰与杂峰分离效果良好，分离度大于2.0；理论塔板数按蛇床子素峰计算应不小于3000；阴性对照色谱在相应位置上无干扰峰。见图1。2.2对照品溶液的制备精密称取蛇床子素对照品10.5mg于2

5、5ml的棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，制成0.42mg/ml的蛇床子素对照品储备液；再精密吸取此液1ml至25ml的棕色量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，得0.0168mg/ml的蛇床子素对照品溶液。2.3供试品溶液、阴性对照溶液的制备精密量取本品2ml至10ml的棕色量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜0.45μm滤过，取续滤液，即得。另按处方比例和样品制备工艺制成不含蛇床子的阴性微乳，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。2.4线性范围的考察精密吸取蛇床子素对照品储备液0.25，0.5，0.75，1.0，1.5，2.0ml置25ml的棕色量瓶

6、中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；分别精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以对照品进样量(μg)为横坐标，以峰面积(mAUmin)为纵坐标，进行回归处理，得标准曲线方程：Y=49.75X＋0.3873，r=0.9997；结果表明在0.042~0.336μg范围内，蛇床子素的峰面积与进样量呈良好线形关系。2.5最低检出限实验在本色谱条件下，使蛇床子素峰高为仪器响应噪声的3倍高，测得蛇床子素的最低检出量约为0.1mg。2.6精密度与稳定性实验精密吸取上述对照品溶液（浓度：0.0168mg/ml）10μl，重复进样6次。依法测定蛇床子素的峰面积，计算RSD=0

7、.26%，说明仪器的精密度良好；另取同一供试品溶液在12h内，每相隔2h进样，依法测定蛇床子素的峰面积，计算RSD=0.84%，表明供试品溶液在12h内稳定。2.7重现性实验分别精密称取同一批样品5份，按供试品溶液的制备方法配制，依法测定，计算蛇床子素含量，RSD=1.83%，测定结果说明，蛇床子素含量测定结果重现性良好。2.8加样回收率实验精密量取6份含量为0.103mg/ml的本品1ml容量瓶中，精密梯度加入蛇床子素对照品溶液（浓度：0.105mg/ml），按含量测定项下的条件和方法测定，计算回收率，结果见表1。表1回收率实验结果样品量（略）2.9样品测定取

8、3批样品，按供试品溶液的