壁虎不同提取工艺成分抗肿瘤作用的研究论文

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1、壁虎不同提取工艺成分抗肿瘤作用的研究论文李钦青，孙明江，代龙，孔令提【摘要】目的比较壁虎不同提取工艺成分对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫器官的影响。方法以肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型，以抑瘤率及胸腺、脾脏指数为指标比较壁虎原粉及水煎煮、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解等不同工艺成分的抗肿瘤作用。结果3种酶解工艺成分对肉瘤S180和H22肝癌抑瘤率均明显高于原粉与水煎煮液，相比模型组有显著性差异(P0.05)，但对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响。结论壁虎酶解工艺成分对S180、H22荷瘤小鼠均有明显抗肿瘤作用。【关键词】壁虎

2、;酶解;抗肿瘤;S180;H22壁虎，别名守宫、壁虎、蝎虎、天龙.freelg/支，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：08051354，氟尿嘧啶注射液(5-Fu)，上海旭东海普药业有限公司，批号:080302。壁虎购自济南兴旺蟾业，经本校周风琴教授鉴定系壁虎科动物无蹼壁虎Gekkosl∶0.5g的混悬液，备用。2.1.2水煎煮提取液的制备取壁虎细粉，加8倍量水煮沸煮沸60min，离心，残渣加8倍量水煮沸30min，离心，合并上清液，浓缩至1:0.5(每毫升药液相当于0.5g药材，下同)，即得水煎煮提取液。2.1.3胃蛋白酶酶解液的制备5取壁虎细粉90g，置于组织

3、捣碎器中，加入5倍量水，匀浆(10000r/min)10min，等分为3份，取1份，煮沸15min，放冷，调节pH2.0，移至37℃恒温水浴锅中，保温10min，加入1%胃蛋白酶，2h后取出，离心(4000r/min)10min，取上清液，微滤(0.22μm)，超滤(相对分子质量3000)，收集相对分子质量小于3000部分，浓缩至1∶0.5，即得胃蛋白酶酶解液。2.1.4胰蛋白酶酶解液的制备6取“2.1.3”项下一份样品液，煮沸15min，放冷，调节pH7.5，移至55℃恒温水浴锅中，保温10min，加入1%胰蛋白酶，3h后取出，离心(4000r/min)10

4、min，取上清液，微滤(0.22μm)，超滤(相对分子质量3000)，收集相对分子质量小于3000部分，浓缩至1∶0.5，即得胰蛋白酶酶解液。2.1.5仿生酶解液的制备取“2.1.3”项下一份样品液，煮沸15min，放冷，调节pH2.0，移至37℃恒温水浴锅中，保温10min，加入1%胃蛋白酶，2h后取出，调节pH7.5，移至55℃恒温水浴锅中，保温10min，加入1%胰蛋白酶，3h后取出，离心(4000r/min)10min，取上清液，微滤(0.22μm)，超滤(相对分子质量3000)，收集相对分子质量小于3000部分，浓缩至1∶0.5，即得仿生酶解液。2.

5、2抗肿瘤作用的比较72.2.1对S180荷瘤小鼠的影响无菌抽取传代8d的S180腹水小鼠腹腔肿瘤细胞，加入生理盐水调整浓度至4×109个/L，于每只小鼠右腋下注射0.2ml，接种140只。接种24h后，将小鼠随机分为7组，每组20只，即模型组、原粉组、水煎煮组、胃蛋白酶酶解组、胰蛋白酶酶解组、仿生酶解组与阳性对照组。模型组灌胃生理盐水10ml·kg-1，连续10d;原粉组、水煎煮组、胃蛋白酶酶解组、胰蛋白酶酶解组、仿生酶解组均5g药材·kg-1药液，连续10d;阳性对照组腹腔注射环磷酰胺，剂量30mg·kg-1，连续3d;给药量均为10ml·kg-1。第11天

6、，各组动物颈椎脱臼处死，剥离肿瘤、胸腺、脾脏，称重，计算抑瘤率、胸腺与脾脏指数，计算公式如下：抑瘤率(%)=(空白组瘤重均值-样品组瘤重均值)/空白组瘤重均值×100%胸腺(脾脏)指数=重量(mg)/体质量(g)2.2.2对H22荷瘤小鼠的影响建模方法、给药方式、剂量均同S180荷瘤小鼠(对照组为5-Fu，25mg·kg-1)。2.3统计学方法实验数据采用SPSS10.0统计软件进行分析，所有测定数值以±s表示，采用方差分析法进行分析，P0.05为有显著性差异，P0.01为有极显著性差异。3结果3.1对S180荷瘤小鼠的影响3.1.1对S180荷瘤小鼠抑瘤率的

7、影响结果见表1表1对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的影响3.1.2对S180荷瘤小鼠脾脏、胸腺指数的影响结果见表2表2对S180荷瘤小鼠免疫器官的影响3.2对H22荷瘤小鼠的影响3.2.1对H22荷瘤小鼠抑瘤率的影响结果见表3表3对H22荷瘤小鼠抑瘤作用的影响3.2.2对H22荷瘤小鼠脾脏、胸腺指数的影响结果见表4表4对H22荷瘤小鼠免疫器官的影响4讨论壁虎在临床上常用于肿瘤，特别是消化道肿瘤的治疗，一般焙干研细或水煎煮入药，但壁虎起抗肿瘤作用的物质基础还不清楚。小分子肽抗肿瘤作用逐渐引起了人们的注意。越来越多的研究表明，动、植物含有小分子肽具有很好的抗肿瘤作用，世

8、界上许多国家正在竞相研究开发小分子肽类