中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究

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1、中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究刘菲，王建刚，席守民，马晓娟【摘要】　　目的探讨中药壁虎抗肿瘤作用及其作用机制。方法建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,将50只雌鼠随机分为对照组、环磷酰胺组、壁虎高组、中组、低组共5组，分别给于生理盐水灌胃1次/d，CTX（100mg/kg）腹腔注射1次，壁虎高、中、低组（13.5，9，4.5g/kg），每天灌胃1次。14d后,称取荷瘤小鼠瘤重、胸腺重、脾脏重，计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数，观察腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞实验指标；用SABC免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFG

2、F)的蛋白表达，TUNEL方法检测细胞凋亡率。结果中药壁虎可抑制小鼠肉瘤S180生长，高、中、低组抑瘤率可达49.8%，52.8%，43.1%；对免疫器官无影响；可降低肿瘤组织VEGF，bFGF蛋白的表达，诱导肿瘤细胞凋亡。结论中药壁虎有抗肿瘤活性，其抗肿瘤的部分作用可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡及抑制肿瘤血管的生成而实现。【关键词】中药壁虎小鼠肉瘤S180血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子　　Abstract：ObjectiveTostudytheanti-tumoractionofGeckoanditsmechanism.Methods

3、ThetransplantedtumormodelofthemouseS180saraicelydividedintofivegroups,thecontrolgroup,theCTXgroup,theGeckogroup(highdose,middledose,loinistrationofsaline,andintraperitonealinjectionofCTX100mg/kgonlyonetime,oraladministrationofGeckoindosesof13.5，9，4.5g/kg,onetimeaday.After1

4、4days,theanti-tumoractivityortissuepactonimmuneorganusindex,spleenindexandthenumberofperitonealmacrophagemunohistochemistry.Thecellapoptoticrateethod.ResultsChinesemedicineGeckocouldobviouslyinhibitS180saraofmice,theinhibitingratepactonimmuneorgan.ItcouldreduceVEGFandbFGFp

5、roteinexpressionintumortissueandinducetumorcellapoptosis.ConclusionChinesemedicineGeckohasanti-tumoractivityanditsmechanismmightberelatedtoinductionoftumorcellapoptosisandthedoedicineGecko；S180saraofmouse；Vascularendothelingrol，24h后将小鼠随机分成生理盐水对照组、CTX组、中药壁虎高（13.5g/kg）、中(9g/

6、kg)、低(4.5g/kg)3个剂量组共5组,每组各10只，每日小鼠称重后，阴性对照组根据体重按0.2ml/10g用生理盐水灌胃1次，环磷酰胺（CTX）按100mg/kg第1天腹腔注射1次，壁虎组用0.2%羧甲基纤维素稀释至高（0.675g/ml）、中(0.45g/ml)、低(0.225g/ml)浓度混悬液，按0.2ml/10g根据体重每天灌胃一次，共14d。14d后小鼠称重，眼眶取血计数白细胞数，脱臼处死取瘤块称重。　　肿瘤抑瘤率=(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%〔2〕　　1.2.2中药壁虎对荷瘤小鼠免疫功能的

7、影响　　按上述方法对小鼠S180移植瘤的抑制作用观察14d后，处死动物取胸腺、脾脏称重。胸腺指数=胸腺重/体重，脾脏指数=脾脏重/体重〔3〕；观察荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响〔4〕，对小鼠S180移植瘤的抑制作用观察第14天，用药后2h每鼠腹腔注射5%鸡红细胞0.4ml，12h后处死动物消毒腹部，剪开皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动固定板1min，然后抽取腹腔液1ml滴涂于干净载玻片，置于37度的孵箱中温育30min，以丙酮-甲醇液（1∶1）固定5min，再用4%姬姆萨瑞特氏液染色5min，用蒸馏水漂洗晾干。在油镜下计数200个巨噬细

8、胞中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及每个巨噬细胞中被吞噬的红细胞数，按下公式计算：　　吞噬百分率（%）=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/200个巨噬细胞×100%　　吞噬指数=被吞噬的鸡红细