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时间:2018-11-18
《丹参酮ⅱa对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及机制研究论文》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、丹参酮ⅡA对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及机制研究论文杨萍,李杰,周凤华,李丽君,贾钰华【摘要】目的观察丹参酮ⅡA对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用差数贴壁法体外分离培养新生乳鼠心肌细胞,以200μmol/L过氧化氢作用2h模拟心肌细胞氧化应激模型,分别以丹参酮ⅡA高、中、低剂量在造模前干预24h。采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡率.freelol/L过氧化氢作用2h后,细胞活力显著降低,凋亡率显著增高。与模型组比较,丹参酮ⅡA显著增加心肌细胞活力,降低细胞凋亡率。过氧化氢可导致心肌细胞LDH
2、活性及MDA含量显著增加,并使总抗氧化能力(T-AOC)、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力显著降低,丹参酮ⅡA可呈浓度依赖性显著降低LDH活性及MDA含量,增加总抗氧化能力(T-AOC)、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力。结论丹参酮ⅡA可以抑制过氧化氢诱导的心肌细胞损伤,这可能与其增强细胞抗氧化酶活力,降低脂质过氧化反应有关。【关键词】丹参酮ⅡA;心肌细胞;氧化应激ChinaAbstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectandmechanismofTanshinoneⅡAonmyocardialdama
3、geinducedbyhydrogenperoxide.MethodsPrimaryculturedneonateratmyocardialcellediumol/Lhydrogenperoxide,andthemediumentedinedbyMTTmethod.AnnexinV/PIbivariatedyeingodelgroup,cellviabilitydecreasedsignificantlyandapoptosisraterosesignificantlyparedalgroup.paredodelgroup,TanshinoneⅡAincrea
4、sedcellviabilityanddecreasedapoptosisrateinadose-dependentmanner.paredalgroup,LDHandMDAincreasedremarkably,andT-AOC,SOD,.freelarkablyinmodelgroup.paredodelgroup,TanshinoneⅡAdecreasedLDHandMDAsignificantly,andincreasedT-AOC,SOD,GSH-Px,CATsignificantlyinadose-dependentmanner.Conclusio
5、nTanshinoneⅡAcanreducemyocardialdamageinducedbyhydrogenperoxide,themechanismmayberelatedentantioxidaseactivity,anddecreaseoflipidperoxidation.Keyia/reperfusion,I/R)损伤所带来的问题日益明显[1]。许多实验研究已证明,在心肌损伤区有大量自由基产生,自由基产生的氧化损伤是心肌损伤的重要因素,而应用自由基清除剂可以减轻组织细胞的损伤[2]。丹参是我国的传统中药,被广泛用于冠心病的治疗。丹参酮ⅡA(tans
6、hinoneⅡ,TSN)是丹参最重要的生物活性部分[3]。本实验以体外培养的乳鼠心肌细胞为基础,以H2O2诱导细胞损伤为模型,旨在研究丹参酮ⅡA在氧化应激条件下对心肌细胞的保护作用,探讨其可能的作用机制,阐释丹参治疗心肌缺血性疾病的机理。1材料1.1动物出生1~3d雄性EM培养基购于Gibico公司;丹参酮ⅡA购于中国药品生物制品检定所(批号110766-200417);乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒、总抗氧化能力(T-AOC)测
7、定试剂盒购自南京建成生物工程研究所;AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司。2方法2.1分组原代乳鼠心肌细胞经分离、纯化后进行实验分组,分为以下几组:①正常组:培养的正常心肌细胞培养;②模型组:心肌细胞培养液中添加200μmol/LH2O2作用2h;③丹参酮ⅡA高剂量组:心肌细胞用丹参酮ⅡA1×10-4mol/L培养24h后添加200μmol/LH2O2继续作用2h。④丹参酮ⅡA中剂量组:心肌细胞用丹参酮ⅡA5×10-5mol/L培养24h后添加200μmol/LH2O2继续作用2h。⑤丹参酮ⅡA低剂量组:心肌细胞用丹参酮
8、ⅡA1×10-5mol/L培养24h后
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