黄芪对培养心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用论文

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1、黄芪对培养心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用论文【关键词】过氧化氢【Abstract】AIM:ToinvestigatetheprotectiveeffectsofAstragalus(AS)oncardiomyocytesagainsthydrogenperoxide(H2O2)inducedinjury.METHODS:Culturedneonatalcardiomyocytesalgroup;②H2O2group,inmol/L）for1h;③AS+H2O2group,ing/mL）30minbefore

2、H2O2treatment.Colorimetricassayitochondrionactivity,lactatedehydrogenase(LDH)activity,superoxidedismutase(SOD)activityandmalonaldehyde(MDA)content.RESULTS:Aftertreatmentitochondrionactivityalgroupalgroup.SApretreatmentmarkedlyincreasedthemitochondrionactiv

3、ityto0.50±0.05andreducedLDHactivityto（16.4±1.8）μkat/L.Cellstreatedol/Lparedalcells.CellsofSA+H2O2grouphadahigherSODactivityof（331±40）μkat/Landalool/LparedyocytesfromH2O2injurybyimprovingcellantioxidantability.【Keyembranaceus,myocardium/cytology;hydrogenper

4、oxide【摘要】目的：探讨中药黄芪（Astragalus，AS）对培养的心肌细胞氧化性损伤的保护作用及其机制.方法：体外培养的新生大鼠心肌细胞，分为3组：①对照组（Normal组）；②H2O2组：H2O2（0.2mmol/L）与心肌细胞共育1h；③黄芪+H2O2组：黄芪处理心肌细胞30min后，加入H2O2与心肌细胞共育1h.心肌细胞损伤以细胞线粒体活性和乳酸脱氢酶（LDH）活性来表示，同时检测心肌细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，均以比色法检测.结果：H2O2处理细胞后可使细胞LD

5、H活性显著增高（27±3）μkat/L，细胞线粒体活性明显下降0.36±0.04，SOD活性较正常细胞显著下降（231±22）μkat/L.freelol/L.黄芪处理细胞后可显著提高心肌细胞线粒体活性0.50±0.05，降低LDH活性（16.4±1.8）μkat/L；并提高细胞抗氧化能力，表现为较H2O2处理组，SOD活性增高（331±40）μkat/L，MDA含量下降（10.7±2.4）μmol/L.结论：黄芪可对抗H2O2对心肌细胞的损伤，其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力有关.【关键词】黄芪；心肌/

6、细胞学；过氧化氢0引言黄芪（Astragalus，AS）自古以来就被《神农本草经》列为上品，它含有多糖、甙、黄酮和微量元素等多种成分，近来的研究表明黄芪对肾病、心脑血管疾病和免疫系统疾病均有较好的疗效，尤其广泛用于心肌缺血时的辅助治疗，但其作用机制尚不明确.心肌缺血再灌注是治疗缺血性心脏时不可避免的损伤，其中氧化自由基损伤是一个主要的原因.本实验中我们以体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞为基础，以过氧化氢造成氧化自由基损伤模型［1］，观察黄芪处理细胞后对H2O2损伤的抵抗作用.1材料和方法1．1材料1～3d龄新生S

7、D大鼠仔鼠购于第四军医大学实验动物中心.四甲基偶氮唑蓝（MTT）购于Sigma公司.黄芪注射液（2g/mL，970806）购于上海福达制药有限公司.胎牛血清、高糖Dulbecco最低必需培养液（DMEM）购于Hyclone公司.LDH,SOD,MDA检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所.1．2方法1.2.1心肌细胞培养取1～3dSD仔鼠，在其剑突下剪开十字切口，取下心脏，磷酸缓冲液（PBS）冲洗后，将心肌组织剪碎经1g/L胶原酶消化，收集消化后的悬液，加入少量含100mL/L胎牛血清（FCS）的高糖DMEM

8、，1000r/min离心5min，弃去上清，以高糖DMEM悬浮，接种于10cm培养皿中，用差速贴壁法于37℃,50mL/LCO2孵箱中培养45min.将培养液离心，再次接种于含100mL/L胎牛血清的DMEM中，细胞密度约为5×105/L.24h后，换为不含血清的高糖DMEM培养液.取生长72h的心肌细胞进行实验研究.1.2.2实验分组心肌细胞分别接种于24孔板和96孔板，每组6孔.实验分为：①正常对照组（Nor