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时间:2018-11-28
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1、中药对培养心肌细胞损伤保护作用的研究进展 本文就近年来有关中药保护心肌细胞的研究情况综述如下。 1 对缺糖缺氧损伤的保护作用 大量实验研究表明,培养的心肌细胞如缺糖缺氧6小时,则迅速引起细胞内能量耗竭,导致细胞功能受损,LDH等酶溢出,并伴有细胞超微结构损害。研究发现,中药能有效地对上述损害起保护作用。张家新〔1〕研究发现:在LDH酶水平显著高于正常对照组(P<0.01)的缺糖缺氧心肌细胞培养液中,加入玫瑰茄提取液后,培养液中的LDH显著低于未加药物的缺糖缺氧组(P<0.05),提示该药物能较好的对缺糖缺氧损伤起保护作用
2、。陈兴坚〔2〕等将中药提取物酸枣仁总皂甙分别用两种浓度(33μg/ml和11μg/ml)加入模型组中,结果发现高浓度组可减轻缺糖缺氧心肌细胞LDH的释放,低浓度组则没有这样的作用,说明该药对心肌细胞的保护作用存有量效关系。值得一提的是:培养的心肌细胞对不同中药的浓度反应也有较大差异,杜锐生〔3〕研究发现,100μg/ml与250μg/ml的三七总皂甙均能减少缺糖缺氧组心肌细胞的LDH与α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)的释放,但作用以100μg/ml浓度为明显,250μg/ml的浓度反有减弱的趋势,提示中药保护心肌细胞与适宜的浓
3、度相关,过大过小均不能达到最大效应。 有关中药保护心肌细胞缺糖缺氧损伤机理的研究,近年来也取得了长足的进展。洪行球〔4〕采用中药复方何氏心悸方(党参、五味子、麦冬等)观察其对细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响,该酶是三羧酸循环及线粒体氧化磷酸化有关的主要酶。实验发现,缺糖缺氧组细胞内SDH染色示活性明显降低,加入该药抽滤液后可明显提高SDH的活性,且使细胞搏动恢复,说明何氏心悸方是通过改善心肌细胞内代谢起到保护心肌细胞作用。汪长华〔5〕等采用计算机技术和SDH染色相结合的方法。将该酶活性量化,并检测LDH.心肌细胞内总
4、磷酯和总胆固醇含量以及Ca2+—Mg2+ATP酶活性进行综合分析发现,大豆磷脂脂质体可抑制心肌细胞培养液中LDH的活性和心肌细胞内SDH的反应性增加,减轻心肌细胞Ca2+—Mg2+ATP酶活性的降低,提高心肌细胞总磷脂和总胆固醇的含量,说明大豆磷脂脂质体减轻培养心肌细胞缺糖缺氧性损伤,可能与其作用于细胞膜脂质有关。近年来,有关中心肌细胞保护作用机理研究已达到分子水平。杜锐生〔3〕用同位素标记法研究发现,三七总皂甙可以减少缺糖缺氧心肌细胞DNA合成的降低。王玮〔6~7〕用精制血府胶囊(柴胡、赤芍、红花、桃仁等)取药给兔灌胃后,
5、心脏采血,分离含药血清,研究其对缺糖缺氧心肌细胞的保护作用,发现该药可以提高缺糖缺氧心肌细胞的3H—urid(尿嘧啶核苷)及3H—Leu(亮氦酸)的掺入率,提示中药能够减轻缺糖缺氧心肌细胞的DNA、RNA、蛋白质等大分子物质的合成,起到保护心肌细胞的作用。王玮进一步研究显示,该药能够改善心肌细胞-氧化氦合成酶(NOS)基因的表达,可能亦是精制血府胶囊保护心肌细胞的重要机理之一。 心肌细胞超微结构的研究,进一步对中药保护心肌细胞提供形态学依据。陈家畅〔8—10〕发现缺糖缺氧6小时的心肌细胞核畸形,染色体边缘浓缩,线粒体肿胀,
6、嵴消失,甚至出现空泡变性,此外,肌原结构破坏,有些区域偶见Z膜和A带,I带模糊不清或消失。有些肌原纤维有断裂和破碎,分别加用黄芪、当归,当归养血汤等后,大部分细胞核正常、染色质均一,肌原纤维内粗细肌丝排列整齐,Z膜、A带和I带清楚。局部未见肌原纤维断裂破碎,说明上述中药有较好的抗心肌细胞缺糖缺氧损伤作用。金花淑〔11〕发现,熊胆能够明显恢复缺糖缺氧心肌细胞的核畸形、线粒体及肌浆网肿胀,并与对照组比较,糖元增加,分布均匀。另外,中药对缺氧再给氧对心肌细胞结构性损伤也有很好的保护作用。万华印〔12〕发现:正常细胞超微结构清晰,缺
7、氧15分钟心肌细胞结构基本正常,仅偶见线粒体嵴变平、消失,而缺氧复氧组心肌线粒体损伤明显,肿胀、嵴溶解消失,并可见致密体,A带和I带消失。加入酸枣仁皂甙组及SOD组细胞超微结构明显改善,仅见部分线粒体肿胀,肌原纤维排列整齐,A带、I带清晰可见。提示:酸枣仁总皂甙有明显的抗缺氧复氧损伤作用。 2 对缺氧再给氧损伤的保护作用 现代病理生理学研究提示:缺氧再给氧损伤主要表现在自由基损伤及钙超载两个方面。参照Laurse〔13〕法建立心肌细胞缺氧再给氧损伤模型。万华印〔14〕发现:缺氧再给氧时,心肌细胞内超氧化构歧化酶(SOD)
8、活性降低,过氧化产物丙二醛(MDA)升高,细胞膜脂质流动性下降,酸枣仁总皂甙能够剂量依赖地显著降低缺氧再给氧心肌细胞MDA的含量。提高SOD活性。增加细胞膜流动性。说明其具有抗自由损伤的作用。杨世杰〔15〕研究外源性自由基损伤黄嘌呤一次黄嘌呤氧化酶(x-xo)系统,损伤的心肌细胞,发现损伤
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