三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响

《三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响【关键词】三氧化二砷　　TheInfluenceofArsenicTrioxideontheGroeraseActivityofHumanLargeIntestineCarcinomaCells　　Abstract：ObjectiveTostudytheinfluenceofarsenictrioxideonthegroeraseactivityofhumanlargeintestinecarcinomacelllines.MethodsTheinfluenceofgroanlargeintestinecarcinomacelll

2、inesLoVoandCoLo320inducedbyAs2O3injectionethod,Trypanbluemethod,3(4,5dimethylthiazole2yl)2,5diphenyltetrazoliumbromide(MTT)assay.Telomeraseactivityofthecarcinomacellseasuredbythemethodofrepeatampliticationprotocol(TRAP)biningidegelelectrophosis(PAGE)silverstainingmethodbeforeandaftert

3、hetreatmentanlargeintestinecarcinomacelllinesLoVoandCoLo320.AlsothetolemeraseactivityofLoVoandCoLo320treatedbyAs2O3injectionedependentrelationship.ConclusionAs2O3hassignificantinhibitioneffectonthehumanlargeintestinecarcinomacelllines,aybecloselyrelatedtoAs2O3'sinhibitingeffectonthecarcin

4、omacelltolemeraseactivity.　　Keya;CellLines;ArsenicTrioxide;Tolemerase　　摘要：目的探讨三氧化二砷（As2O3）注射液对人类大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响。方法采用活细胞观察法、台盘兰拒染法和四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法，严密观察As2O3注射液对人大肠癌细胞株LoVo和CoLo320生长的影响；应用端粒重复序列扩增法（TRAP）—聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）银染法检测As2O3注射液处理前、后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果As2O3注射液能够显著地抑制LoVo和CoLo320细胞株的生长，并对癌

5、细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用，该作用呈现出一定的浓度和时间依赖性。结论As2O3注射液的确对于人大肠癌细胞株的生长具有显著的抑制作用，该作用可能与As2O3注射液能够抑制癌细胞的端粒酶活性密切相关。　　关键词：大肠癌；三氧化二砷；细胞株；端粒酶　　0引言　　三氧化二砷（As2O3）是剧毒中药砒霜的有效成分,自20世纪70年代以来，我国学者率先研制成功As2O3注射液，用于治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)，取得了世人瞩目的突破进展[15]。近年来，应用As2O3注射液治疗多种实体瘤的实验和临床研究方兴未艾，受到了广泛重视[68]。2004年11月经国家食品药品监督管理

6、局（SFDA）批准增加了As2O3注射液可用于治疗晚期原发性肝癌，从而显示出更为广阔的应用前景。为了积极拓展As2O3注射液治疗其他消化道肿瘤的适应证，我们课题组业已开展该药在体内、外抗大肠癌作用的一系列实验研究，初步结果十分令人鼓舞[9,10]。本实验以两株离体人大肠癌细胞LoVo和CoLo320为研究对象，严密观察了As2O3注射液体外对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响，现报告如下：　　1材料和方法　　1.1细胞株　　人大肠癌细胞株LoVo和CoLo320，均引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。　　1.2主要试剂　　1g/LAs2O3溶液，即亚砷酸注射液(哈尔滨

7、伊达药业公司产品，批号20001102)。四甲基偶氮唑蓝（MTT），购自Fluka公司。银染TRAP试剂自配。Ts引物序列为5’AATCCGTCGAGCAGAGTT3’，Cx引物序列为5’CCCTTACCCTTACCCTTACCCTAA3’,均由中科院上海细胞生物研究所合成。CHAPS购于Sigma公司,TaqDNA多聚酶购于Promega公司。聚丙烯酰胺为EMERCK公司产品。　　1.3细胞培养　　将LoVo和CoLo320细胞株接种于无菌培养瓶中，加入含小牛血清、青链霉素的培养液，